大鼠生精干细胞的培养

sunny218

各位高手们，我才开始做SSC，做了两次都不是很成功，想向各位高手们请教一下。3 y# X) W' Z  j* o4 @4 n
1，要用什么方法去分离纯化大鼠的生精干细胞会比较好？0 }! O; k1 C( V7 O8 N. U
2，用什么培养基才能在体外长期培养？
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3 p2 v7 w9 B2 L7 b7 A8 l* }* z$ r! @# Z3 G  X" K( \
          谢谢各位啦！！！

490096812

刚开始，你就用普通的就可以

sunny218

普通的什么啊？DMEM？还是DMEN/F12  ?

490096812

都行，我们第一种撒

细胞海洋

回复 sunny218 的帖子4 P) Y- X  G( R$ `* @

' E0 l3 G6 n) R# l1 _. g* \你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样- O/ I2 G* D9 _( g9 c

/ S  K5 l) ?; |5 ^& `0 `+ C否则他会看不到
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sunny218

回复 细胞海洋 的帖子0 y. V* M  V# y6 z
) p1 H9 e( T7 K. z- w
好的，谢谢！

sunny218

回复 490096812 的帖子, M. j( |* S! `+ _/ n9 `) J

. Z; M6 T  w2 M1 A那你们适用什么方法分离纯化的啊？怎个过程都是要无菌的吧？我可能是不太熟悉，经常会污染，要么就是细胞第二天就都死啦！！！谢谢你的回复啊！！

w343989328

回复 sunny218 的帖子
* E2 F- p. e% G" F4 z4 \
4 W! a7 p7 O3 c8 l- d- T+ Z2 [' @为什么会那么容易污染呢？你分原代细胞，培养基里面肯定要加双抗的啊。起码传个一两代再把双抗去掉吧

w343989328

纯化的话，视你的目的而定。如果只是单纯的建系，而且还处于摸索阶段，那么我建议你用差速贴壁法。这是比较经济的做法，而且现在大鼠SSC的marker尚无定论。SSC的培养体系比较复杂，具体的你可以看点文献再做决定。brinster团队和T.shinohara都是这方面的大牛，Dym Martin也有不少工作

qingchen

回复 sunny218 的帖子/ o- ~% V$ I3 Q" u, I

; u5 [' f9 \; K9 d/ _两种抗生素没加么？还是液体没有消毒？还是消毒方式有问题？还是操作时未注意无菌？总之污染的因素很多！有时候即使液体有一点细菌的话也会感染的！另外你用什么牌子的滤膜：？滤膜不干净也可能造成污染啊！