大鼠生精干细胞的培养

sunny218

各位高手们，我才开始做SSC，做了两次都不是很成功，想向各位高手们请教一下。" W. r: U) r: t# D( U* x  }
1，要用什么方法去分离纯化大鼠的生精干细胞会比较好？$ q) s0 P7 ~, N8 H/ \" B
2，用什么培养基才能在体外长期培养？0 i8 {5 S# A3 T0 ^. ^9 w

: @4 G& w* z- I: ~5 R0 f( ?; e
1 Y& S% |7 w/ z6 u0 m' q          谢谢各位啦！！！

490096812

刚开始，你就用普通的就可以

sunny218

普通的什么啊？DMEM？还是DMEN/F12  ?

490096812

都行，我们第一种撒

细胞海洋

回复 sunny218 的帖子
4 ], e9 F) J+ i3 l; e! \" _! x) i% D) k! P
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
% n4 b5 c0 T. G7 p# A: L  R
) q* q$ U. q. L2 Y+ ~3 G+ f( g5 o否则他会看不到/ V$ ]# L7 c; ^* [8 z* T( A

sunny218

回复 细胞海洋 的帖子5 J! \2 T# ~; ^% N  h- v$ S3 h

* X1 O4 a& R7 I2 o$ h1 o5 O; Z, ~好的，谢谢！

sunny218

回复 490096812 的帖子
+ i" y' T5 T) g" \
% u& L2 O$ C' }" {& _0 ~那你们适用什么方法分离纯化的啊？怎个过程都是要无菌的吧？我可能是不太熟悉，经常会污染，要么就是细胞第二天就都死啦！！！谢谢你的回复啊！！

w343989328

回复 sunny218 的帖子) J! n% n$ T9 ]/ G0 d# F$ N
! c. n5 E& Z# R7 {
为什么会那么容易污染呢？你分原代细胞，培养基里面肯定要加双抗的啊。起码传个一两代再把双抗去掉吧

w343989328

纯化的话，视你的目的而定。如果只是单纯的建系，而且还处于摸索阶段，那么我建议你用差速贴壁法。这是比较经济的做法，而且现在大鼠SSC的marker尚无定论。SSC的培养体系比较复杂，具体的你可以看点文献再做决定。brinster团队和T.shinohara都是这方面的大牛，Dym Martin也有不少工作

qingchen

回复 sunny218 的帖子
7 V( a8 E* s! q+ y1 \7 V$ Q6 M; @  X! R4 p7 C6 v( q
两种抗生素没加么？还是液体没有消毒？还是消毒方式有问题？还是操作时未注意无菌？总之污染的因素很多！有时候即使液体有一点细菌的话也会感染的！另外你用什么牌子的滤膜：？滤膜不干净也可能造成污染啊！