求鉴定-诱导分化成脂肪细胞和油红O染色照片

myylovewp

最近刚接触干细胞的诱导分化，用的Gibco的试剂盒。诱导成脂肪细胞20天细胞内左右出现类似油滴的亮点（图一），油红O染色后没有上色。改变染色方法后（没有用60%异丙醇漂洗，仅用水洗），背景没洗干净。可是很少细胞内出现图二的红色，没洗干净的那些杂质是什么？怎样才能除去。求大家帮我鉴定一下，万分感谢！

2014-4-17 14:23 上传

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2014-4-17 14:25 上传

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图片二

穿裙子的猫

我想问一下，你的这个试剂盒有配方吗

myylovewp

回复 suning5 的帖子, B4 d( G. ^, d; \6 t- L( V8 A

. p: a7 t' U6 @+ k1 G7 m" _0 N$ a# C谢谢

suning5

制备Oil Red O：将0.15g的Oil Red O溶解于50ml异丙酮中，制成0.3%(w/v)的贮存浓度，室温保存。使用时用去离子水稀释成0.18%使用。

myylovewp

回复 luyue6453 的帖子' N" `7 V" H4 e( ?" Z7 u9 r
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我们一般在细胞融合度达70-80%的时候加入诱导液，大约一周就能看到油滴出现。

luyue6453

回复 myylovewp 的帖子
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细胞长到什么情况的时候可以开始诱导了？我现在养了8天了，

myylovewp

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1 V2 i* G$ {: j1 V+ O我买了几个专门过滤有机物的滤头过滤油红，杂质就没有了。有的细胞很好诱导，4-6d就能看到结果，比如脐带源MSC，有的就很难诱导。

雁南飞

染色时间再长一点，30分钟，滤纸吸去染液就可以了，染色后不用再洗，试试。

1824368

加油加油

luyue6453

回复 myylovewp 的帖子5 ~7 f0 a% M' b- m
7 A* C% y. V* b
我现在才开始做诱导实验，不知道您的成功没，你出现的问题解决没？