求鉴定-诱导分化成脂肪细胞和油红O染色照片

myylovewp

最近刚接触干细胞的诱导分化，用的Gibco的试剂盒。诱导成脂肪细胞20天细胞内左右出现类似油滴的亮点（图一），油红O染色后没有上色。改变染色方法后（没有用60%异丙醇漂洗，仅用水洗），背景没洗干净。可是很少细胞内出现图二的红色，没洗干净的那些杂质是什么？怎样才能除去。求大家帮我鉴定一下，万分感谢！

2014-4-17 14:23 上传

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2014-4-17 14:25 上传

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图片二

jane1lee

油红是自己配的吗，最好过滤下

刘慧瑾

挺好的，继续努力

myylovewp

回复 jane1lee 的帖子, G8 `4 b: L7 B1 n0 ?
& @2 k: D& v: E# j& |* U" N, z
油红O是自己配的。0.5g油红溶于100ml异丙醇里，滤纸过滤保存在4度冰箱。染液用6ml的油红O+4ml水，过滤后静置10min才用的。
% N( b* z; v7 A; q% i4 m我想请教一下您染色完您是怎么漂洗的？用水还是60%的异丙醇？

myylovewp

回复 刘慧瑾 的帖子% M4 _: F# Q) A, F2 Y

! |% e+ l- v. E# q$ `. W4 M0 Z请教您一下，我图片一里的是油滴吗？怎么染色后细胞外红红的杂质是什么？

huangcong1988

木有成功

沙漠狐o0

重新做一次吧，杂质是油红O颗粒，过滤的时候多加层滤纸试一下。- R+ d& ^8 x9 F5 ?% k9 l0 P

myylovewp

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* D" W/ `4 ?6 n9 T- Q% \- E" _& Z, O, G, O( x0 I) o" D  K* s
谢谢您的解答，我是用单层滤纸过滤后，再用0.22um的过滤器过滤染液的。下次试试多层滤纸过滤

myylovewp

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8 s- v! Y5 ?3 h4 o$ b3 G% {5 l: t  b8 S& z4 Y  x3 i; i
谢谢，我再诱导一次试试。

luyue6453

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8 e2 z: \; Y9 R( e' W0 S
; I8 O7 e! d& b) g2 I8 U. P/ x2 G我现在才开始做诱导实验，不知道您的成功没，你出现的问题解决没？