求鉴定-诱导分化成脂肪细胞和油红O染色照片

myylovewp

最近刚接触干细胞的诱导分化，用的Gibco的试剂盒。诱导成脂肪细胞20天细胞内左右出现类似油滴的亮点（图一），油红O染色后没有上色。改变染色方法后（没有用60%异丙醇漂洗，仅用水洗），背景没洗干净。可是很少细胞内出现图二的红色，没洗干净的那些杂质是什么？怎样才能除去。求大家帮我鉴定一下，万分感谢！

2014-4-17 14:23 上传

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2014-4-17 14:25 上传

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图片二

jane1lee

油红是自己配的吗，最好过滤下

刘慧瑾

挺好的，继续努力

myylovewp

回复 jane1lee 的帖子
7 O; R1 q+ W" P8 N5 k% M& S( m2 F4 v& A
油红O是自己配的。0.5g油红溶于100ml异丙醇里，滤纸过滤保存在4度冰箱。染液用6ml的油红O+4ml水，过滤后静置10min才用的。( ^' x6 R6 v0 C" T( ^3 u' |
我想请教一下您染色完您是怎么漂洗的？用水还是60%的异丙醇？

myylovewp

回复 刘慧瑾 的帖子# [* \7 i. C* A9 L$ @
' ]* c; [# d3 Q# q  P2 h
请教您一下，我图片一里的是油滴吗？怎么染色后细胞外红红的杂质是什么？

huangcong1988

木有成功

沙漠狐o0

重新做一次吧，杂质是油红O颗粒，过滤的时候多加层滤纸试一下。
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myylovewp

回复 沙漠狐o0 的帖子$ _! N8 a4 u% R% F0 j. y) ^: ~
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谢谢您的解答，我是用单层滤纸过滤后，再用0.22um的过滤器过滤染液的。下次试试多层滤纸过滤

myylovewp

回复 huangcong1988 的帖子
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; I- r! u7 N+ f2 f& |# A谢谢，我再诱导一次试试。

luyue6453

回复 myylovewp 的帖子3 I, ~+ D& h+ x
1 Z, |' B- ~! m' G* e" V" R
我现在才开始做诱导实验，不知道您的成功没，你出现的问题解决没？