求鉴定-诱导分化成脂肪细胞和油红O染色照片

myylovewp

最近刚接触干细胞的诱导分化，用的Gibco的试剂盒。诱导成脂肪细胞20天细胞内左右出现类似油滴的亮点（图一），油红O染色后没有上色。改变染色方法后（没有用60%异丙醇漂洗，仅用水洗），背景没洗干净。可是很少细胞内出现图二的红色，没洗干净的那些杂质是什么？怎样才能除去。求大家帮我鉴定一下，万分感谢！

2014-4-17 14:23 上传

下载附件 (17.69 KB)

2014-4-17 14:25 上传

下载附件 (131.6 KB)
图片二

jane1lee

油红是自己配的吗，最好过滤下

刘慧瑾

挺好的，继续努力

myylovewp

回复 jane1lee 的帖子" o9 Q/ f* r" l) C0 V- N1 ?
  L2 Z! Q1 I) R- L$ Q- q
油红O是自己配的。0.5g油红溶于100ml异丙醇里，滤纸过滤保存在4度冰箱。染液用6ml的油红O+4ml水，过滤后静置10min才用的。2 }$ @8 \& @1 Z' Q- `3 h4 Y$ l
我想请教一下您染色完您是怎么漂洗的？用水还是60%的异丙醇？

myylovewp

回复 刘慧瑾 的帖子7 D; [4 R- P& Y. b6 T/ R9 O: ?
" Q- C" P- a6 x5 i9 {1 Y
请教您一下，我图片一里的是油滴吗？怎么染色后细胞外红红的杂质是什么？

huangcong1988

木有成功

沙漠狐o0

重新做一次吧，杂质是油红O颗粒，过滤的时候多加层滤纸试一下。0 F1 n$ R. S2 K1 S

myylovewp

回复 沙漠狐o0 的帖子+ A- V5 @7 j% c: x3 Q! m

) z% S# n% D7 R( q2 I* F谢谢您的解答，我是用单层滤纸过滤后，再用0.22um的过滤器过滤染液的。下次试试多层滤纸过滤

myylovewp

回复 huangcong1988 的帖子- c& q  n# p* w: B3 e- R$ D
+ U" E, g9 N/ S( w0 [
谢谢，我再诱导一次试试。

luyue6453

回复 myylovewp 的帖子0 O8 M% w& [# H8 V5 g! ~- F4 S
8 V1 v( D: R/ L9 i2 ^. e* J+ k  b5 H
我现在才开始做诱导实验，不知道您的成功没，你出现的问题解决没？