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[请教] 求鉴定-诱导分化成脂肪细胞和油红O染色照片   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-4-17 14:26 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
最近刚接触干细胞的诱导分化,用的Gibco的试剂盒。诱导成脂肪细胞20天细胞内左右出现类似油滴的亮点(图一),油红O染色后没有上色。改变染色方法后(没有用60%异丙醇漂洗,仅用水洗),背景没洗干净。可是很少细胞内出现图二的红色,没洗干净的那些杂质是什么?怎样才能除去。求大家帮我鉴定一下,万分感谢! 图片1.jpg 图片二
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沙发
发表于 2014-4-18 08:35 |显示全部帖子
回复 jane1lee 的帖子
# T; B$ _9 ^" {/ i# j& t
% k1 A, k+ `) n. {0 Y% K油红O是自己配的。0.5g油红溶于100ml异丙醇里,滤纸过滤保存在4度冰箱。染液用6ml的油红O+4ml水,过滤后静置10min才用的。
5 c5 n7 t- P& O9 W0 E* Y我想请教一下您染色完您是怎么漂洗的?用水还是60%的异丙醇?
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藤椅
发表于 2014-4-18 08:52 |显示全部帖子
回复 刘慧瑾 的帖子
: }, m5 e9 z4 L, `3 f- p7 e" l! b+ z0 H+ |
请教您一下,我图片一里的是油滴吗?怎么染色后细胞外红红的杂质是什么?
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板凳
发表于 2014-4-21 11:03 |显示全部帖子
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回复 沙漠狐o0 的帖子/ a1 [  k) ?1 q; W% E: ~6 n/ f0 v

7 n2 d; C" h8 x: e! b& w谢谢您的解答,我是用单层滤纸过滤后,再用0.22um的过滤器过滤染液的。下次试试多层滤纸过滤
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报纸
发表于 2014-4-21 11:06 |显示全部帖子
回复 huangcong1988 的帖子
+ Y2 H6 l* V; _& p5 [- r, Z7 u8 }$ Q
谢谢,我再诱导一次试试。

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地板
发表于 2014-6-5 10:29 |显示全部帖子
回复 luyue6453 的帖子2 b0 f5 i: m- @/ _$ a- F
+ N& _$ y+ }. Z" \& l
我买了几个专门过滤有机物的滤头过滤油红,杂质就没有了。有的细胞很好诱导,4-6d就能看到结果,比如脐带源MSC,有的就很难诱导。
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发表于 2014-6-6 11:09 |显示全部帖子
回复 luyue6453 的帖子
9 T) D3 E9 t1 y0 s! ?. ?5 D5 h/ W) ]" b- M/ d' }" b9 Q7 U
我们一般在细胞融合度达70-80%的时候加入诱导液,大约一周就能看到油滴出现。
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发表于 2014-6-19 11:25 |显示全部帖子
回复 suning5 的帖子
6 U- [" \8 Y+ z" Y$ B+ ^+ e3 O4 b, I8 w* m# [: ^
谢谢
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