求鉴定-诱导分化成脂肪细胞和油红O染色照片

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最近刚接触干细胞的诱导分化，用的Gibco的试剂盒。诱导成脂肪细胞20天细胞内左右出现类似油滴的亮点（图一），油红O染色后没有上色。改变染色方法后（没有用60%异丙醇漂洗，仅用水洗），背景没洗干净。可是很少细胞内出现图二的红色，没洗干净的那些杂质是什么？怎样才能除去。求大家帮我鉴定一下，万分感谢！

2014-4-17 14:23 上传

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2014-4-17 14:25 上传

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图片二

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回复 jane1lee 的帖子( t. ?* Y6 K0 X6 i' Z0 n
$ A5 O' A& {+ u; e
油红O是自己配的。0.5g油红溶于100ml异丙醇里，滤纸过滤保存在4度冰箱。染液用6ml的油红O+4ml水，过滤后静置10min才用的。
) S* i0 e, Q1 B5 z我想请教一下您染色完您是怎么漂洗的？用水还是60%的异丙醇？

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回复 刘慧瑾 的帖子
8 @0 R3 s2 X6 x- u3 Z$ L& h3 Q8 L# v9 k( @: I; N
请教您一下，我图片一里的是油滴吗？怎么染色后细胞外红红的杂质是什么？

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回复 沙漠狐o0 的帖子0 y7 o0 z( {& [3 Y
) S" p7 C# v% F+ w2 c3 O
谢谢您的解答，我是用单层滤纸过滤后，再用0.22um的过滤器过滤染液的。下次试试多层滤纸过滤

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回复 huangcong1988 的帖子8 W- K, t$ d* \' k1 B

# v% R* r7 Q7 V, l7 ~谢谢，我再诱导一次试试。

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回复 luyue6453 的帖子' K! v& T6 ^# ^( K4 A4 E" b* t9 j
' m2 W8 C, o  p/ Z3 \4 L/ l
我买了几个专门过滤有机物的滤头过滤油红，杂质就没有了。有的细胞很好诱导，4-6d就能看到结果，比如脐带源MSC，有的就很难诱导。

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回复 luyue6453 的帖子
0 M& i4 {- A. `' e% R/ D% g1 n
4 _4 M. ~' n* K( q我们一般在细胞融合度达70-80%的时候加入诱导液，大约一周就能看到油滴出现。

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回复 suning5 的帖子2 C- b# z  H3 k* r: \5 B3 @
% W  G+ I, @& j% {' a; M- w. |6 d0 f
谢谢