关于胚胎干细胞消化用accutase的中止消化问题

shaozi402

我们胚胎干细胞的消化用accutase，用培养基中止消化；但是发现这样有点浪费培养基，培养基很贵的。考虑是不是可以用DMEM/F12来替代胚胎干细胞的培养基来中止消化呢？或者可以用其他的试剂来中止消化？求解，谢谢！

Jonathan

早就说过这个问题了。accutase不是用培养基终止的，你加培养基，只是把accutase稀释了。我一直用F12稀释，一直没问题

sc-cxw

accutase消化不需要终止消化，换种说法即说消化到最佳时间时，只需要加入相应的适当体积的培养基继续培养即可。

shaozi402

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: ]4 L" U& F% j/ m% ^& ~我用F12试了一下，确实可以。

shaozi402

回复 Jonathan 的帖子, z) c; @% [" k6 e
0 u" Q! m  b. D; i, s. o9 D
谢谢

shaozi402

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# d4 _& e0 N$ t" J5 Y  q3 h
, h" b" Y8 b: `5 S9 ]+ W3 Q4 u不需要离心去除吗？
' S1 o' E* V* q9 N5 N

sc-cxw

回复 shaozi402 的帖子  t% x  d0 P# G+ g* S/ L% t
2 q# M9 [8 J) L! q" I( M6 u
不需要

bubble_w

请问accutase消化到什么程度终止消化最佳？是把细胞吹下来，还是刮下来？

shaozi402

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9 x1 f, D4 I+ T# J& ]! O6 O) G3 D! w) d
克隆球周边卷曲，大约3-5min，即可用细胞吹打下来。

bubble_w

回复 shaozi402 的帖子6 B5 K3 D; v- K8 V( f  D. c

: {5 `$ c" @+ ]! v吹打下来之后 克隆是小的团块还是已经变为单细胞