大家看过来---小鼠BM-MSC

yiwuya007

# G& [5 B! T, \: J3 g
2 ]6 v  `& d% e6 Z
分离的小鼠BM-MSC: i& ~9 O& s4 F- l+ n
全骨髓法，hyclone的HG-DMEM+10% Hyclone 胎牛血清( n, O8 M8 Y& z: G2 l, L8 k
传了两次了，但是长得特别慢，一次要10天左右才能传
: ^9 ^( z/ h; D. j' [7 S( \照了几张照片，大家看看，有两个问题
( s. x/ B& v; h2 F! H9 ?; y9 z9 I  J
1. 为什么细胞分布呈几条平行的直线？（10x那张照片）
; W6 i9 U( i4 ?" ?6 E5 e2. 为什么长得这么慢？培养基和胎牛血清不合适？; b+ S3 Z0 o6 Y
3.为什么有的细胞个体小而且单个分布，有的看似比较大而且长在一起？

yiwuya007

回复 wangshan 的帖子7 Z8 |, y0 W' D) _8 y6 }2 l$ _. `

* ^8 H. w5 N" B$ E1 d& P1. 细胞分布呈线性的问题：我们传了两代，在每个皿中都看到了这种现象5 k3 v8 h7 ], s! T- ~
2. 我们分离后，传了两次，1：2 和1：1.5传，每次都非常慢) f5 M' O7 A% ?
3.正像你所说的，单个分布的，好像不能形成克隆。是什么原因导致这些单个分布的不形成克隆呢？
, f0 P# P7 C0 O) g3 n+ B

yiwuya007

回复 倒腾细胞 的帖子; |3 V/ p0 e0 [$ |+ g! P" Y+ L$ k

" X+ X+ f! `; }* A( j. J刚刚传过两代的细胞，6/16刚刚分离的，原代细胞长了3-4天就长满了，
8 E6 \5 o/ |! F! \) R8 p% s4 P谷氨酰胺我没有额外加，可能是这个原因？

yiwuya007

回复 gzeb 的帖子5 M6 y7 x, @0 F' j# H

% {; l" x, G! ^* h4 E也是最近才开始养这个细胞，前面分过一次，老化了。
! n& ^& o0 t/ o( j& e2 M. h- l: t% V前面一次也出现了分布呈线性
! Y* r  d, p7 |培养基是买的Hyclone的500mL的液体，用之前，上周刚刚加了FBS。
! _* j/ E' {0 k" a: d没有加谷氨酰胺

yiwuya007

回复 luyue6453 的帖子5 T/ L2 Z* g! H; T# s6 B
* ~  p  t( X, _& ~
你的意思是长得慢也是正常的？. [+ Y1 q6 b$ o0 w7 D6 e* q( o6 c
非常担心老化了，因为第一次分离的细胞就老化了

yiwuya007

回复 sysuhoo 的帖子4 J# |1 \- v3 |3 y- Q

1 I5 B2 E* H+ K7 z( x谢谢. , a* w, y. o6 x4 ]  l- v
1。 能否给出cell stem cell那篇文章的具体信息？
, S1 R. U  t0 `3 B, M8 m2。 血清20%不会导致分化吗？

yiwuya007

回复 viv2005 的帖子
* }8 k* ^5 [( D7 e$ g2 Y
8 y+ g1 ?7 c. x) y+ r$ y能否愿意提供哪种血清效果好？谢谢。9 W' |3 }! {3 _
老鼠年龄的问题，看了多篇文献，多篇讨论，但是用多大的都有，甚至有说成年了，更好。这个，我觉得和老鼠个体有关。我提过两次了，第一次的骨髓腔显然没有第二次的红，其实两次年龄差不多。

yiwuya007

回复 viv2005 的帖子
: f6 j9 n& R) e) P) {( t2 {, P! e' }. |9 s8 L0 c0 U/ B& |
A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compact bone." i! W& s& k6 m4 r4 Z2 u
我记得好像是这篇文章