293t细胞形态异常，是支原体污染吗？

LuXK

. |$ D" \0 y* w, B! Q6 `: r) L0 `; L* A( R) F# ]
最近养的293T细胞形态出现异常，在正常细胞中会出现变圆的细胞，一块一块的，慢慢的就会脱落死亡。有些形态看上去挺正常的，但是包病毒后细胞慢慢就死了，见图。有没有战友遇到过类似的问题？是支原体污染吗？
) I& U9 V; l  D5 }; @

cao8194595

回复 LuXK 的帖子
# o4 F8 I$ D' r8 X) x
+ l' {5 O) }9 x在出现上述情况的时候培养液颜色有改变吗，会不会变黄，在高倍镜下看是不是有会快速移动的东西？不一定是你们的问题，如果是支原体污染可能在冻存的时候就会发生，如果仅仅出现在你们实验室的话可能是血清的问题。如果生长不缓慢只是空泡化并脱落的话也可能是黑胶虫污染，或者是病毒感染，因为空泡化是细胞病变的一个主要特征。

LuXK

回复 wwy551 的帖子
" z% h; U2 Y* c2 k' G
% p9 t) p. Y# k. `. D7 {; v6 r  ~! H“细胞不转质粒还行，转完质粒就变圆，贴壁也不好。”这种情况确实有，那我先换细胞用用试试，谢谢你的建议。

wwy551

回复 LuXK 的帖子
9 b/ n, Z) \! k8 p2 Q: P" d0 f- ]+ a1 r0 [- y5 b( q
应该是。我之前碰到过相同情况，细胞不转质粒还行，转完质粒就变圆，贴壁也不好。我当时用的293T也是从别人那里来的，自己刚开始用了几代包病毒也还行。$ E: }; Q) Q, m$ E; b
别人用没事儿，甚至到了你自己手里用几代没事儿，不说明任何问题，你根本不知道293T已经养了多少代了，虽说是建系的，但是用时间久了，状态不好很正常。碰到这种情况，别纠结了，直接换细胞。

184lj

取细胞培养上清液跑个PCR检测一下就可以了。

LuXK

回复 yuanyan2010 的帖子
) z5 g+ V' H0 I8 C/ x- O/ j" t$ w3 F% |) l
应该不是细菌或真菌污染，培养基中很干净，而且也不会很快变黄。

LuXK

回复 wwy551 的帖子( Z- ]. B4 W3 P" H" T$ E8 O

$ ]# |$ N8 R; I2 n# }应该不是，从别人那里要的细胞，他们的养的没问题

LuXK

回复 get0715 的帖子4 L3 K  {% p6 ^3 {$ k1 h
: X/ s; @/ @( }  ]9 @
嗯，谢谢

LuXK

回复 Jonathan 的帖子" z: C6 u5 v/ P( h* p+ d
7 }  i6 `6 ?; G6 S& O- w
不是细菌污染，培养基很干净

yuanyan2010

感觉是细菌或者真菌污染。支原体污染是肉眼不可见的。