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[请教] 293t细胞形态异常,是支原体污染吗?   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-7-16 10:42 |只看该作者 |正序浏览 |打印
本帖最后由 LuXK 于 2014-7-16 10:55 编辑 0 C) L# y+ z* C+ k

& i4 M' w# B# {; K- F% U+ p1 [* ?最近养的293T细胞形态出现异常,在正常细胞中会出现变圆的细胞,一块一块的,慢慢的就会脱落死亡。有些形态看上去挺正常的,但是包病毒后细胞慢慢就死了,见图。有没有战友遇到过类似的问题?是支原体污染吗?
2 g: n$ N, B  k0 P9 ]/ A

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包病毒后1

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包病毒后

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发表于 2014-7-17 16:49 |只看该作者
回复 LuXK 的帖子7 H; Y" l* D1 |

9 G, I  M, U$ k6 \; B% a; E" B/ v' V. r5 V在出现上述情况的时候培养液颜色有改变吗,会不会变黄,在高倍镜下看是不是有会快速移动的东西?不一定是你们的问题,如果是支原体污染可能在冻存的时候就会发生,如果仅仅出现在你们实验室的话可能是血清的问题。如果生长不缓慢只是空泡化并脱落的话也可能是黑胶虫污染,或者是病毒感染,因为空泡化是细胞病变的一个主要特征。
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发表于 2014-7-17 11:13 |只看该作者
回复 wwy551 的帖子4 Q+ K; H- g! }4 k8 m% ]; B4 m
# C) y' ~) d& W# \! v
“细胞不转质粒还行,转完质粒就变圆,贴壁也不好。”这种情况确实有,那我先换细胞用用试试,谢谢你的建议。

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发表于 2014-7-17 10:48 |只看该作者
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回复 LuXK 的帖子6 P* D& F( P" t* i) B$ i6 ~
* b. R: _/ P) w8 B, A1 i
应该是。我之前碰到过相同情况,细胞不转质粒还行,转完质粒就变圆,贴壁也不好。我当时用的293T也是从别人那里来的,自己刚开始用了几代包病毒也还行。
' M2 O. _( k. B. |, T7 U别人用没事儿,甚至到了你自己手里用几代没事儿,不说明任何问题,你根本不知道293T已经养了多少代了,虽说是建系的,但是用时间久了,状态不好很正常。碰到这种情况,别纠结了,直接换细胞。
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发表于 2014-7-17 10:04 |只看该作者
取细胞培养上清液跑个PCR检测一下就可以了。
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发表于 2014-7-17 08:41 |只看该作者
回复 yuanyan2010 的帖子3 t) S" Z6 R7 k! X. m5 w+ k
- f, b% [# I( I" M1 C
应该不是细菌或真菌污染,培养基中很干净,而且也不会很快变黄。

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发表于 2014-7-17 08:40 |只看该作者
回复 wwy551 的帖子
% I; p  Q8 C7 |
7 ]* D" b8 o8 a: T应该不是,从别人那里要的细胞,他们的养的没问题

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发表于 2014-7-17 08:38 |只看该作者
回复 get0715 的帖子, K) m; Q' D$ E
% y; J* R2 d+ y$ t$ \5 C/ m
嗯,谢谢

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发表于 2014-7-17 08:38 |只看该作者
回复 Jonathan 的帖子
5 M6 a1 D0 R. Q4 ~. r: {: \4 [: {; P( ^% K- I0 r9 T' \- U
不是细菌污染,培养基很干净

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发表于 2014-7-16 19:23 |只看该作者
感觉是细菌或者真菌污染。支原体污染是肉眼不可见的。
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