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[请教] 293t细胞形态异常,是支原体污染吗?   [复制链接]

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发表于 2014-7-16 10:42 |只看该作者 |正序浏览 |打印
本帖最后由 LuXK 于 2014-7-16 10:55 编辑
* F' O) z/ A  D' d& V6 S7 I0 x9 z1 e0 z
最近养的293T细胞形态出现异常,在正常细胞中会出现变圆的细胞,一块一块的,慢慢的就会脱落死亡。有些形态看上去挺正常的,但是包病毒后细胞慢慢就死了,见图。有没有战友遇到过类似的问题?是支原体污染吗?$ }) W/ ]0 A' @' J. [

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包病毒后1

包病毒后1

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4X

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包病毒后

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发表于 2014-7-17 16:49 |只看该作者
回复 LuXK 的帖子: S) H: W5 ^1 I9 }
* ]% N/ o) J$ e7 R) ]! b
在出现上述情况的时候培养液颜色有改变吗,会不会变黄,在高倍镜下看是不是有会快速移动的东西?不一定是你们的问题,如果是支原体污染可能在冻存的时候就会发生,如果仅仅出现在你们实验室的话可能是血清的问题。如果生长不缓慢只是空泡化并脱落的话也可能是黑胶虫污染,或者是病毒感染,因为空泡化是细胞病变的一个主要特征。
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发表于 2014-7-17 11:13 |只看该作者
回复 wwy551 的帖子
* ]! W4 `4 `5 l- A5 S" `0 f0 c
" P% t! B" {  ]9 o& c, z“细胞不转质粒还行,转完质粒就变圆,贴壁也不好。”这种情况确实有,那我先换细胞用用试试,谢谢你的建议。

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发表于 2014-7-17 10:48 |只看该作者
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回复 LuXK 的帖子3 Y, F1 G3 Z- S, e

" Z( f( m* `7 B; Q应该是。我之前碰到过相同情况,细胞不转质粒还行,转完质粒就变圆,贴壁也不好。我当时用的293T也是从别人那里来的,自己刚开始用了几代包病毒也还行。! ]' |! T! Q2 T7 r
别人用没事儿,甚至到了你自己手里用几代没事儿,不说明任何问题,你根本不知道293T已经养了多少代了,虽说是建系的,但是用时间久了,状态不好很正常。碰到这种情况,别纠结了,直接换细胞。
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发表于 2014-7-17 10:04 |只看该作者
取细胞培养上清液跑个PCR检测一下就可以了。
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发表于 2014-7-17 08:41 |只看该作者
回复 yuanyan2010 的帖子: k9 S+ h& R& A3 i: t+ y5 t
4 C+ O* ?! O' {3 l$ {4 E
应该不是细菌或真菌污染,培养基中很干净,而且也不会很快变黄。

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发表于 2014-7-17 08:40 |只看该作者
回复 wwy551 的帖子3 A# h; f. E4 }  E4 W1 x% p

* {/ f, J7 `5 k/ q应该不是,从别人那里要的细胞,他们的养的没问题

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发表于 2014-7-17 08:38 |只看该作者
回复 get0715 的帖子
8 n4 _: f# j% z! l/ o5 [
1 p& l) t, f, X' Q/ \' e! N嗯,谢谢

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发表于 2014-7-17 08:38 |只看该作者
回复 Jonathan 的帖子# _. M5 u( M- n& }; H) E  o

( H5 B/ G  R$ P' F4 X% E不是细菌污染,培养基很干净

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发表于 2014-7-16 19:23 |只看该作者
感觉是细菌或者真菌污染。支原体污染是肉眼不可见的。
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