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楼主: 倒腾细胞
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坑爹的消化,胰酶和细胞都不行了吧   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-10-8 09:24 |显示全部帖子
前几天我们也遇到了这样的问题,分析当时的原因有以下几点:
: v. @+ ?& M8 ?8 {1. 消化前没有用生理盐水清洗,因为有残余培养液的存在主要是血清的存在,导致胰酶消化效果受影响1 n5 Q& M$ j1 {6 _* X  D
2. 加入胰酶的量太少,T75的瓶子加入3ml,基本没有铺开整个瓶子
) r2 k5 w3 ~! C2 z! C4 Z0 P7 V1 M3. 消化时间太短,在胰酶量少的情况下消化了2ml左右,仅有1/4的细胞消化下来
# J& o6 j- V7 s0 K5 _. V8 e4. 反复消化,看到大部分细胞没有消化下来又继续消化,有1/3的细胞下来后收集细胞后又加入胰酶再次消化,最终仍有1/3的细胞还贴在壁上,所幸后来细胞长的还不错
- Q, [1 g. U: X8 p综上所述,应该先清洗再加入适量的胰酶消化合适的时间
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