BMSC成软骨诱导分化

liukuantj

各位前辈，小弟正在做兔骨髓间充质干细胞成软骨分化。有几个问题想请教下有经验的前辈，希望指导。
& o& q$ |* O# l- ~$ p1，诱导分化培养基的配制是否需要添加血清？我看国外的文献大部分都是无血清诱导，但也有人推荐使用10%浓度的FBS，不知到底该选择哪种？$ N! Q8 ~9 [. F3 U% a1 G
2，诱导分化培养基中抗坏血酸的浓度要多高，是50ug/ml还是50mg/ml？为什么文献差别那么大？
& C  B$ k% ~3 U. x. R$ u2 {3，文献中采用pellet法进行诱导，不知道为什么诱导后，形成的小球越来越小？最后直径只有大约0.5-1mm左右，太小了。
* M: N7 {8 V; \) F1 C0 F4，诱导后的小球做切片，进行甲苯胺蓝染色，和HE染色，为什么会有很多空泡？是怎么回事？6 F1 ^* i" g" K  L. d
5，不知有没有前辈用过V型96孔板进行诱导？根本不能形成小球呀，只是一层膜状物质,不知是何原因？
; F9 u/ F# W! b3 D( p; S2 q0 @还麻烦各位大神指导一下，不胜感激呀！

liukuantj

liukuantj 发表于 2014-10-30 20:52
( ~6 D$ V0 k/ f( c- a, j各位前辈，小弟正在做兔骨髓间充质干细胞成软骨分化。有几个问题想请教下有经验的前辈，希望指导。' {3 \. v6 l5 z  r! @$ _( w
1，诱导 ...

' I; Z1 ?# n+ _谢谢鼓励，想请教下，为什么我用15ml离心管做pellet法诱导，最后的小球会越来越小？