BMSC成软骨诱导分化

liukuantj

各位前辈，小弟正在做兔骨髓间充质干细胞成软骨分化。有几个问题想请教下有经验的前辈，希望指导。+ P/ h" N1 U2 w4 a) p; Y2 a- Z; q
1，诱导分化培养基的配制是否需要添加血清？我看国外的文献大部分都是无血清诱导，但也有人推荐使用10%浓度的FBS，不知到底该选择哪种？4 {& A2 y- w" ~; P5 d
2，诱导分化培养基中抗坏血酸的浓度要多高，是50ug/ml还是50mg/ml？为什么文献差别那么大？
: y! z8 P  |. B! B: x& t) Q3，文献中采用pellet法进行诱导，不知道为什么诱导后，形成的小球越来越小？最后直径只有大约0.5-1mm左右，太小了。
' c& {, \- \: E5 R4，诱导后的小球做切片，进行甲苯胺蓝染色，和HE染色，为什么会有很多空泡？是怎么回事？
/ Q5 z4 i1 R4 l4 J( ]) x" u5，不知有没有前辈用过V型96孔板进行诱导？根本不能形成小球呀，只是一层膜状物质,不知是何原因？& n0 D! k3 R1 u3 p! G6 t
还麻烦各位大神指导一下，不胜感激呀！

liukuantj

liukuantj 发表于 2014-10-30 20:52 4 h; E/ c4 m2 |! w3 u: r7 J
各位前辈，小弟正在做兔骨髓间充质干细胞成软骨分化。有几个问题想请教下有经验的前辈，希望指导。
' s2 i& F! r- k& v( }! K1，诱导 ...

8 j% I' W9 `$ }! i& v谢谢鼓励，想请教下，为什么我用15ml离心管做pellet法诱导，最后的小球会越来越小？

ytumuyangren

MSC成软诱导，诱导液中不添加血清，体系中的ITS中含有一部分的血清替代物。1 t4 r0 E2 q1 m3 l5 ?
MSC成软诱导很不好做，建议买现成成熟的诱导液，方便快捷；自己配置的诱导体系不容易诱导成功；
/ u% F2 d; l4 G5 F2 \采用pellet法，pellet会随着诱导时间的推移慢慢增大；预祝楼主实验顺利！