BMSC成软骨诱导分化

liukuantj

各位前辈，小弟正在做兔骨髓间充质干细胞成软骨分化。有几个问题想请教下有经验的前辈，希望指导。1 W  m* X) R0 t) E5 c
1，诱导分化培养基的配制是否需要添加血清？我看国外的文献大部分都是无血清诱导，但也有人推荐使用10%浓度的FBS，不知到底该选择哪种？  Y& Q) B  k) [, L. o: W  n" A8 ?
2，诱导分化培养基中抗坏血酸的浓度要多高，是50ug/ml还是50mg/ml？为什么文献差别那么大？
; J* q7 }# }0 z7 R& w3，文献中采用pellet法进行诱导，不知道为什么诱导后，形成的小球越来越小？最后直径只有大约0.5-1mm左右，太小了。
0 y- G5 w- W, M5 @4，诱导后的小球做切片，进行甲苯胺蓝染色，和HE染色，为什么会有很多空泡？是怎么回事？6 {- Q* y- Z* k
5，不知有没有前辈用过V型96孔板进行诱导？根本不能形成小球呀，只是一层膜状物质,不知是何原因？
# n' _3 }: p1 ?" l' `7 F还麻烦各位大神指导一下，不胜感激呀！

ytumuyangren

MSC成软诱导，诱导液中不添加血清，体系中的ITS中含有一部分的血清替代物。
, j+ O4 G! n$ L' N% Q( t. SMSC成软诱导很不好做，建议买现成成熟的诱导液，方便快捷；自己配置的诱导体系不容易诱导成功；' V! N# D& r6 \' u3 b$ c
采用pellet法，pellet会随着诱导时间的推移慢慢增大；预祝楼主实验顺利！

liukuantj

liukuantj 发表于 2014-10-30 20:52
0 r8 I. \' Y1 p& {" ^各位前辈，小弟正在做兔骨髓间充质干细胞成软骨分化。有几个问题想请教下有经验的前辈，希望指导。! \- J, @# L' u. L) Z
1，诱导 ...

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谢谢鼓励，想请教下，为什么我用15ml离心管做pellet法诱导，最后的小球会越来越小？