CIK细胞培养一周死亡

sdzhxq

CIK细胞培养细胞提取时数量还可以的，但是培养增殖不是太好，一周后细胞就开始死亡，请问高手们怎么没回事啊？请高手指教

sdzhxq

回复 lyj-0017 的帖子7 K, U" i/ s/ a5 ?! l

! u* [5 X& o- L# ~1 K6 @接种浓度1.1x 106/ml，,第0天加1000单位伽马干扰素，第一天加100ng/mlCD3单抗、1000单位IL-2，以后每3天等量加液，这样培养一周细胞活力就开始下降，因子用的国产的，培养基用的Lonza的，是什么原因呢，是不是接种浓度低呢？请给分析下，谢谢

sdzhxq

回复 lyj-0017 的帖子4 }% B6 B& W- T, e1 i6 ^

8 s+ c" j# I2 w+ ~: F6 I用的是培养瓶

sdzhxq

回复 lyj-0017 的帖子
0 t9 J. o. y4 k' `- D  P% f1 [0 {9 l2 D" Z7 f/ R
D1天细胞有聚集，但没有明显的团块，有细胞团才能说明细胞增殖吗？另外我用的Lonza的培养基需要添加谷氨酰胺吗？您说的接种密度可以再提高一下，密度最好调到多少呢？非常感谢您的回复

sdzhxq

回复 我是丁香 的帖子
0 f9 U7 a7 W4 X) i8 S- H- Q! u. _; x  P! F' [
细胞没拍下来，新手刚做，一共做了3次，都是这样。能够分享您的经验？

sdzhxq

回复 hefan1234 的帖子6 f3 F' r) N$ q) W4 ?$ l

# r# E. a3 U7 t$ l- I7 `我是用脐血培养的，50ml血，提取大约5x107个细胞，培养基加了50ml，没加自体血清，加上自体血清效果会好吗？血清怎么获取，里面含有抗凝剂呀？我们用的采血袋，里面抗凝剂是枸橼酸钠

sdzhxq

回复 我是丁香 的帖子
' i% R8 w* w, @
0 g' Q$ F' S5 D( W# `1 E增殖差，台盼蓝染色有很多死细胞，显微镜下看细胞感觉细胞不完整

sdzhxq

回复 fenlichong 的帖子" ?1 H  r; \4 A7 ~+ W  O5 h5 p( X: l

4 Z; t: p0 H4 N. l# s" j- TPBMC细胞纯度怎么确定是否高于90%？我们实验室培养方法基本都是一致的，有的培养出口细胞增殖倍数也不高，最高40多倍，不像文献上说的增殖几百倍的。

sdzhxq

回复 hefan1234 的帖子
3 j& \" p7 ]9 M2 P
# u. g1 ~7 W9 b, Z谢谢，按照提供的方法试试

sdzhxq

回复 holy0606 的帖子
) T  ]9 Z) G0 e1 M+ [# g9 |
. d8 G% c" [8 E3 H0 s: y我们用的CD3不是进口的，可以吗？下一步可以试试50浓度的