CIK流式检测设门问题

大海之家

       现在要做CIK从采血之日起至培养20内的CD3CD4，CD3CD8，CD3CD56双阳性标志的流式检测，血样先用分离液分离出白膜细胞，进行第一次流式检测。问题就是要测的以上标志为总的百分比，那么这还需要设门吗？（个人觉得不需要设，毕竟是测总含量，但第一次检测，经验不足），白膜细胞中含有一定比例的细小红细胞，会对结果造成影响吗？9 w2 t9 c8 H7 t& r4 l- v* s
        另外，如果要设门，需要调节散点图布局，这个依据是什么？检测用的仪器为贝克曼的FC500，烦请各位有经验的朋友解答以上问题，谢谢！

lyj-0017

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肯定是要圈门的，排除掉细胞碎片和体积较大的细胞，尽量圈散点图中间偏下的细胞群就可以。CD4CD8不会出现在一张流式图中，也不会出现这个双阳的数据，只需要分别染色CD3CD4和CD3CD8两组即可。

大海之家

回复 lyj-0017 的帖子' H1 Y! ~- k* T! {& j5 ?* ~

' I  o% l6 @" C) h是测CIK细胞培养20天内标志物含量，能否不设门？毕竟是获取占总细胞的百分比！双色上机，cd3cd56和cd4cd8的荧光抗体各一组，预计cd4cd8组的散点图会有cd4cd8双阳性细胞的出现，那么统计cd3cd4，cd3cd8双阳性细胞占比是否要减去cd4cd8双阳性的比例？初次操作，经验不足。

qingxingruyu

把绝大部分的圈起来就可以了吧，应该每个人都会不同，但对结果的影响是有限的

lyj-0017

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( Z! @& E5 U! Q% F+ o8 m4 O! g
6 t1 B& U( R8 D) g5 c你是要测20天以内培养的CIK细胞？还是20天以内再采集病人的外周血进行检测？! C, ?2 k# A" B( a1 D
少量红细胞对结果不会产生太大影响。$ k- ^" R2 V: i- f( _* ^
设门首先是要调节电压和阈值，将细胞群分散开。