求助，原代分离羊膜上皮细胞不贴壁

听不到

回复 qiaozhong.9876 的帖子& Q% r0 K( b8 k7 k( o5 f# H
, M5 Z! \  V( V0 a$ r# G
是羊膜上皮细胞，加了因子的，10ng/ml的EGF，是因为重复消化的原因吗？可是消化时间短的话我怕得到的细胞太少啊，那样不是也不能贴壁吗？我查的文献基本都是消化20min什么的，我就整个那样做，但是细胞也不行。应该不是羊膜的问题，因为我做了两次了都不行，而且是同一个问题，就是细胞很多，但不贴壁。我现在思考是不是我培养液的问题，你之前做过吗？培养体系是什么样的啊？  1 _7 g2 N8 \% O: \  p8 y  f% u
之前问了个老师，他也猜我这是消化过度的问题，我之前都没做台盼蓝染色的，下次做的时候再试试吧。唉，愁死了

qiaozhong.9876

回复 听不到 的帖子2 T$ ]- ^$ G# [  I
+ c; k7 C7 {- W% l9 v2 i
我想问一下你的是胎盘羊膜上皮细胞还是什么？你试试培养基里加20%的血清，不知道你的培养基里有没有加因子，这个很重要，我觉得你重复消化，细胞有可能死了，细胞死了也不贴壁，你做个胎盘蓝染色，看看细胞死的多不多，还有一个原因就是这个羊膜本身的问题，有的羊膜上的细胞就是不贴壁