CIK细胞一夜之间灰飞烟灭，跪求解答啊。

yinfuhua

回复 yzy017101 的帖子  j9 \2 M$ [( [  V

) K/ v% v. {, M- I; |8 s( [/ Z这是被细菌污染了。赶快弃掉吧！另外，查找一下原因并尽快进行相关处理：1、查验所用培养液、因子，做下检测看是否被细菌污染（包括耗材）；2、对CO2培养箱、超净台擦拭消毒、紫外线照射消毒；3、做下环境监测等等。再做细胞培养时从更衣开始就严格按规定的要求去做，不得马虎。

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- m  r3 d! j0 a2 {' _1、从你上传的几张图片看应该是革兰氏阳性细菌。（短杆菌？球菌？短杆的可能性大点。放大倍数有点小看不太清）% J( D& e+ B4 R$ n' ~
2、你问“细胞培养液革兰氏染色结果判断标准”，其实细胞培养液及培养过程中，革兰氏染色阳性及阴性菌都不得出现。发现了就必须果断的按规定处理，否则后果不堪设想。6 o/ p0 c( H: n; R& A3 _  g5 g
3、如果你问的是革兰氏染色判断标准，我建议你上网查一下，有视频教学的，也有文字的。阐述的很清楚。

yinfuhua

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: E3 z2 A; D; O" ?9 F. k: e9 r先扫盲一下细菌形态学，再明确革兰氏染色原理，分清楚阳性菌（染成紫色）、革兰氏阴性菌（复染成粉红色或浅粉色）细菌的不同点。多看，多操作。慢慢就会有经验的。

yinfuhua

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只提到“有几个红点”还无法判断结果是什么。有图片吗？

yinfuhua

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% }# W  R" w3 Y' @看到了。染成红色的应该是细胞碎片。

yinfuhua

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呵呵，我没有说清楚哈。其他的小点（结合你前几天发的图片看）就是革兰氏阳性细菌。说明培养过程中被细菌污染了。尤其是提供的从加液到细胞全无（其实还有破碎)的时间也符合细菌生长繁殖的时间。看到你说的培养液等情况，操作不当引起的细菌污染可能性较大。

yinfuhua

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在培养14d收集细胞后，再做革兰氏染色--在染色液保质期内、染液没有变质的前提下，按照革兰氏染色步骤进行染色可以看到正常的细胞被复染剂染成红色（一般不会染成紫色）。这是正常现象，不是操作不当。我上面那条“看到你说的培养液等情况，操作不当引起的细菌污染可能性较大”指的是：在加培养液的过程中可能存在操作不当引起细菌污染的情况。跟革兰氏染色无关。还有什么问题？我们可以探讨下。我说的也不一定对，供参考吧。谢谢！

yinfuhua

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从这几张图片看可以肯定不是细菌污染，只是一些杂质。可能是从血清中或其他使用的移液管、离心管、培养瓶等物品中带到培养液里的。

yinfuhua

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对，有的也是细胞的碎片。