台盼蓝染色

花饶然

本人有疑惑：我是从原代组织中分离的细胞，想用台盼蓝测活率，但是有些去除不干净的红细胞会影响吗？如果也能够正常的染上的话，到也无妨吧？

鬼赦秉

要是rbc多的话就会影响你的存活率啊，如果染上了那么死细胞变多，存活率降低……如果没染上，那么活细胞变多，存活率比实际高……& l# e3 u; M/ l. I: C; m
所以还是想办法把红细胞搞干净吧，裂解掉之类的

aochongyu

使用细胞技术仪还是血细胞计数板？要是技术仪的话我们用过红细胞基本没什么影响，活率也没什么事……

amanda1988

有白细胞稀释液可以裂解红细胞

fuyinsheng

回复 花饶然 的帖子
# I, k5 ~, C0 o% V% m! ?2 b7 z: ~; e# ~0 ?% T, I. k( u9 C
无论红细胞是死是活，台盼蓝都不会染上色的，因为成熟红细胞中没有核酸不会与台盼蓝结合。如果你分离的细胞比较大，而红细胞相对又比较少的，能够较好分辨的话就不影响计活。如果难以区分，红细胞又比较多，建议用溶血素先裂解红细胞，然后再进行计活，否则活率易表现为偏大。

花饶然

回复 aochongyu 的帖子) l- G$ X4 s# S) ^% K! u

2 }6 k: Z5 E: \- ]我们也有计数仪的，国产的.。您说的没有影响，具体怎么解释？

花饶然

回复 鬼赦秉 的帖子7 p; o8 i6 m2 j% O

2 ~* W4 \/ Q3 U7 [7 M7 o没染上是会增加整体活率的，但是如果跟白细胞一样能够正常染上，那活率也应该是正常的吧

thor0504

回复 花饶然 的帖子% v$ C( [% n! y: K) U

% d1 ]% b: _+ V* Y2 u依据细胞粒径不同会有影响的，而且影响一般会随着红细胞比例增大而变大，不论红细胞是否能染色，如果粒径与目标接近就可能造成如下影响：! W8 L4 }- ~. h$ h' p/ K, B- [0 G  l
1、按照楼上前辈说的“无论红细胞是死是活都不会染色”，那么计数仪就容易将红细胞视作目标细胞，这样得到的计数结果就会导致目标细胞实际数量低于计数值，而活率高于计数值；
$ Z' t& X% [3 I' h% J1 p+ d2、假设红细胞全部被侵染，所得计数结果总细胞量偏大，或许可显示目标细胞的活细胞量，但细胞活率计数值会偏低；" O" O1 Y8 t' s+ L2 f
3、再假设红细胞部分被侵染，所得计数结果中除总细胞量偏大外，其余活细胞数量值、活率值均会有不同偏差。
* v" u* Z" E* n2 I- u7 H7 m1 U( w2 ?' a
如目标细胞粒径与红细胞粒径差别较大，可以考虑依据粒径不同区分，但仍可能有较小的误差。
6 W2 p2 J+ e* W3 a

chenzhengliang

为了以防万一，还是先用红细胞裂解液（如冰醋酸）先将红细胞去掉，之后再用台盼蓝技术就没什么问题啦。

帝国黑骑士

红细胞应该好辨认，影响不是很大吧，应该是一些细胞碎片到时会误以为是死细胞影响活率计数！所以应该可以直接染色，前提是红细胞不多的情况下！