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求iPS初期克隆图!万分感激 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-12-9 17:33 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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本人在做iPS,用的无饲养层,有克隆形成,但总感觉是太密所致。挑出来的细胞消化成单个细胞长不成克隆。挺奇怪的。哎!郁闷!
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13楼
发表于 2015-1-15 21:17 |只看该作者
不会哦,你也可以用胶原蛋白酶IV消化,这个消化后饲养层不会掉下来,比较干净!
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12楼
发表于 2014-12-23 20:50 |只看该作者
回复 duwenjing 的帖子# h0 ^0 a9 @  G4 z& k9 ?. i  y3 Y
) `/ S$ s% D+ b/ M
胰酶 不会引起细胞分化嘛?
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11楼
发表于 2014-12-23 19:38 |只看该作者
我消化是用的0.25%的胰酶,挺好消化的
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10楼
发表于 2014-12-22 13:38 |只看该作者
回复 heirrii 的帖子$ f: K7 d! Y8 [0 y3 [: h

  s$ N0 U7 k  A想问下你做个相关的试验嘛,你的"EDTA" 是指含有胰酶的EDTA,还是指其他什么试剂呢? 求解,目前我的iPSCs 克隆不是很好消化```
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9楼
发表于 2014-12-22 11:44 |只看该作者
回复 Andyhigh 的帖子, O, E6 s$ m" q1 f  }2 d' ~) Y, l- z

1 w' {" ^: G3 Y0 i8 k1 o( z& h$ y) [你也在做绵羊?

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8楼
发表于 2014-12-22 11:43 |只看该作者
回复 scottist 的帖子
( i4 W. o+ ]- Z3 L& R
# O/ x, t! }5 c' A2 E- J5 T长的像葡萄状,挑之后消化一下,就长不成了!
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7楼
发表于 2014-12-22 11:42 |只看该作者
回复 heirrii 的帖子0 V; J4 [- R6 i- X9 `, B

4 }' \! Z' O. a* C5 I4 R9 Q. A% ?恩!可是初期有很多很克隆。但不确定是不是?还有一些未变化的细胞,所以必须纯化一下。
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发表于 2014-12-15 22:02 |只看该作者
回复 葱葱 的帖子
9 [' L2 Z6 O) @1 t! M( V2 C- G/ l3 Q+ G7 j5 q+ n1 ~" |
绵羊的不好做哈,好像这方面的文章比较少,自己最近也做了下,发下有克隆,但效率好低!
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发表于 2014-12-10 12:15 |只看该作者
回复 heirrii 的帖子" j8 v4 A% m3 k1 `1 _+ B0 v1 |3 A

% D" a" n9 i7 T/ d) M3 `/ p可是,存在没有诱导成功的细胞,它们会增殖的。
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