无血清培养富集肿瘤干细胞的若干问题

hottodeath

我最近刚开始接触富集肿瘤干细胞，用的是MCF-7，看了大家说的，决定用DMEM/F12，加10ng/mL bFGF ， 20ng/mL EGF，  2%B27，  5μg/mL胰岛素，用低粘附的培养皿，是不是可以了？2 V$ R9 a: z) Y. h: ^
之前我没加胰岛素，B27也用错了，不是Minus Vitamin A的，还有操作手法等多种原因，没养出来。胰岛素还不知道要买哪种......' D. P0 L$ Y7 b3 g1 u7 N3 [, ?1 S
好多都不清楚啊，周围也没有在做这个的前辈，只能在这里求大家的指教！！！

hottodeath

有看到用胰岛素转铁蛋白亚硒酸钠添加剂（insulin-transferrin-sodiumselenitesupplement，ITS），也有Insulin, Human Recombinant, Zinc Solution的，是不是都可以啊

hottodeath

回复 木三阿凉 的帖子2 @$ Q  u8 p3 o5 O- B& d: y! h" c

4 N6 \/ ~7 o# v' z% e4 u- ]: ^- y. Z我也是在论坛里看到的，MCF7需要insulin，有促进蛋白质合成，促进增殖的作用。现在还在养，无血清培养基培养了5天了，没看到几个活细胞（我种的密度很低）。

hottodeath

回复 木三阿凉 的帖子3 f( x- S' N) e8 ~3 h4 ~# T
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这个我也不清楚。按以上培养的6天了，MCF-7里面球没看到，活细胞也没见几个了，好悲伤。

hottodeath

请教大神：MDA-MB-231用无血清培养，然后用CD44+CD24-筛选出肿瘤干细胞样细胞吗？MCF-7没有成球的，但MDA-MB-231有... ...

hottodeath

看到文献说MDA-MB-231本来就有高比例CD44+CD24-/low表型的

hottodeath

回复 细胞海洋 的帖子
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0 m1 o; ~$ p4 F  u! \* N& U谢谢！