无血清培养富集肿瘤干细胞的若干问题

hottodeath

我最近刚开始接触富集肿瘤干细胞，用的是MCF-7，看了大家说的，决定用DMEM/F12，加10ng/mL bFGF ， 20ng/mL EGF，  2%B27，  5μg/mL胰岛素，用低粘附的培养皿，是不是可以了？2 S) H. S! \- [( [( N
之前我没加胰岛素，B27也用错了，不是Minus Vitamin A的，还有操作手法等多种原因，没养出来。胰岛素还不知道要买哪种......
& ^* Q- I- ^) s, e" |6 V好多都不清楚啊，周围也没有在做这个的前辈，只能在这里求大家的指教！！！

hottodeath

有看到用胰岛素转铁蛋白亚硒酸钠添加剂（insulin-transferrin-sodiumselenitesupplement，ITS），也有Insulin, Human Recombinant, Zinc Solution的，是不是都可以啊

eanhappy

你们都不加双抗吗

木三阿凉

其他的生长因子都好理解，我想问一下各路大神，这个实验为什么要加胰岛素？

细胞海洋

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木三阿凉

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0 b5 L3 Z: I# O/ \
7 l( m7 {" y  X我也有相同疑惑，不知道这个问题你现在解决了没有？

hottodeath

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: w6 H9 F7 h' b
" p1 ?' B! J, O0 d4 t我也是在论坛里看到的，MCF7需要insulin，有促进蛋白质合成，促进增殖的作用。现在还在养，无血清培养基培养了5天了，没看到几个活细胞（我种的密度很低）。

木三阿凉

回复 hottodeath 的帖子3 ^! c$ P8 p4 i2 M3 K3 k' b

2 n' a# x7 }* m哦，MCF-7必须要添加insulin吗

木三阿凉

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0 u9 T  R  `5 b* M+ U1 p2 U# l4 B/ X) h# p: s7 A- ^& D
哦，MCF-7必须要添加insulin吗

hottodeath

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; N' ^5 r+ t$ A. K7 |这个我也不清楚。按以上培养的6天了，MCF-7里面球没看到，活细胞也没见几个了，好悲伤。