无血清培养富集肿瘤干细胞的若干问题

hottodeath

我最近刚开始接触富集肿瘤干细胞，用的是MCF-7，看了大家说的，决定用DMEM/F12，加10ng/mL bFGF ， 20ng/mL EGF，  2%B27，  5μg/mL胰岛素，用低粘附的培养皿，是不是可以了？1 P4 Y! G( I: Z; [% B
之前我没加胰岛素，B27也用错了，不是Minus Vitamin A的，还有操作手法等多种原因，没养出来。胰岛素还不知道要买哪种......
7 ~* ?! t$ u  f0 \+ S7 r好多都不清楚啊，周围也没有在做这个的前辈，只能在这里求大家的指教！！！

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有看到用胰岛素转铁蛋白亚硒酸钠添加剂（insulin-transferrin-sodiumselenitesupplement，ITS），也有Insulin, Human Recombinant, Zinc Solution的，是不是都可以啊

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回复 木三阿凉 的帖子
2 d, u) B* m9 l' E: A
% P1 a2 ]1 X: G9 D/ e! y7 Y8 P& D我也是在论坛里看到的，MCF7需要insulin，有促进蛋白质合成，促进增殖的作用。现在还在养，无血清培养基培养了5天了，没看到几个活细胞（我种的密度很低）。

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回复 木三阿凉 的帖子2 t+ s( E) r" l" u8 V9 [0 u' G. P
$ F- ?0 l, G( m: x/ b3 E
这个我也不清楚。按以上培养的6天了，MCF-7里面球没看到，活细胞也没见几个了，好悲伤。

hottodeath

请教大神：MDA-MB-231用无血清培养，然后用CD44+CD24-筛选出肿瘤干细胞样细胞吗？MCF-7没有成球的，但MDA-MB-231有... ...

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看到文献说MDA-MB-231本来就有高比例CD44+CD24-/low表型的

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回复 细胞海洋 的帖子
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; W% E" t; Z; u% e1 i4 `* W& k谢谢！