实验室细胞增殖慢，死的厉害

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大家好，我们实验室的细胞感觉增值不起来。
6 s# B2 |, t0 I' I) t4 c1：293T原来2-3天传一次代，但是现在4天都没有达到可以传代的密度。
  O  L( P5 q; j3 |4 q2 W2：养滋养层细胞（用于支持人的胚胎干细胞），如果是未用丝裂霉素处理过的，第一天贴下去还挺好，但是第2-3天就开始死的厉害。如果丝裂霉素处理过，在hESC培液里长得很好，在原先滋养层细胞培养基里（DMEM+10%FBS）就会死的厉害。
; W/ C2 a# E  D; ~1 c" p9 k3：已经检测过支原体，发现没有污染。也换过DMEM,FBS，也没有改善。4 V' X% L7 j7 v/ B& @( n
现在都不敢养细胞了，请大家提一些可能的原因。谢谢！

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回复 奇幻雪蓝 的帖子
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5 t. e" f& H8 ]  A6 Z- b

2015-1-29 15:11 上传

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铺下去第一天的滋养层细胞

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铺下去后第一天观察滋养层细胞
4 `/ g' k% U/ d$ n" m! F$ v, q7 ]) ?! w( ^5 o' l! |' q! E4 P

2015-1-29 15:12 上传

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铺下去第三天的滋养层细胞

: O7 C  M9 ~, }+ k5 M6 ?铺下去后第三天观察滋养层细胞

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回复 yuanyecat 的帖子- |/ X, i. I+ _2 L  N, b
: a$ _( E7 E% |3 R4 h
1：真菌或者细菌感染应该可以肉眼看出来吧？我这个确实看不出来。
" h* \6 h* {+ |3 @$ m3 P2：二氧化碳浓度测试过，没问题。我准备再去测测温度和湿度。
. J$ [2 p6 {, b( e6 z* p1 }) }3 u3：这批细胞原来用都没有问题的，测了支原体，也是阴性的。

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回复 zarecol 的帖子
9 T7 c1 {) d8 O4 ]/ Y3 b& h
2 N$ l; o: Y' A2 L) [, {好的，多谢！

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回复 宋红卫song 的帖子; G5 c* ~" @7 c0 }  V$ b
) ~6 c$ p$ g7 x, B2 T4 k( ^2 h
恩，说的有道理。
% U; f+ a: D# Y! \1 D支原体检测用的是试剂盒，做一个PCR反应，阳性阴性control都正常，我的实验组也没有P出条带。

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回复 dahui 的帖子
/ A0 n- y1 J( j; t; F# ?' j: m) m" S$ K& N1 M
恩，换个GIBCO的试试

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回复 gd541767393 的帖子7 n/ h$ l' [2 }' H

; s. U6 w) u5 G  _: k. M7 p% B, @1 Q内毒素和病毒感染该怎么检测呢？