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人骨髓、脐带血分离提取新方法:
# N) b4 F* j( K V* k* p$ S[分离、纯化后的干细胞检测] , o# i+ q6 v$ g, _
1、细胞存活率检测:使用溴芬蓝染色法。
% h) h8 S7 h! E# M% a. p% a2、所提取的细胞总数计算 " i) G6 a7 k1 R8 X9 D6 s7 @ c" |; H
★细胞计数板计数法 ) r' e5 D/ o. B4 `: @1 l8 I
★血球计数仪计数法
+ ~% v( L0 R+ s) M: h' R3、干细胞的定性测定
1 S) T* O; [$ Y4 j★培养扩增法 & n" L$ ]; j7 ~% |7 v1 [- @
★流式细胞仪检测法,用已知抗原标记后测定。CD34+、CD117+、CD133+、C-kit+、 Sca-1+
$ E. N0 G8 Z3 x6 Q7 B5 d, A- o
$ T; S1 R. L$ S& X4 Y9 `6 ? 负收集混合法
( O4 Y( k2 R0 |( S8 d, }) [8 m3 R分离的
# z# Z! l, g q4 e原理 选择性的除去红细胞、血小板、全部的血浆物质、成熟的白细胞、0 L, j& c, ~& h x
淋巴细胞。保留Lin-细胞 K E8 b6 ?7 \+ P
0 g- X, U3 W, I0 n+ S& f! Z4 x
靶细胞表面标记物 无
0 ?3 M: h0 T3 U+ }6 G收集的靶细胞种类 能收集所有Lin-干细胞/祖细胞
3 ^& d/ ~& f0 c) C! p% j* |4 ~9 |# S
最小体积 0.5ml8 q- l1 o. V" B7 r2 S
动员剂 不需要
+ m5 Y3 ]) w# F2 l8 F+ y" G血浆残留 无 T/ ~5 y, V5 W2 [
分选对象 骨髓、脐带血
1 j/ B/ ]- q2 C, ~6 j( n* x细胞
/ D, O3 N% w0 s. C回收率 ≥85%8 C6 M9 ]7 J' W3 G8 J4 l7 c
细胞/ n9 t& w6 W% {$ p% b
存活率 ≥98% |
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