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人骨髓、脐带血分离提取新方法: R5 \7 f6 }6 B( b
[分离、纯化后的干细胞检测]
7 S; T' K# n5 g, j0 s: x1、细胞存活率检测:使用溴芬蓝染色法。 7 @& C v/ p2 B
2、所提取的细胞总数计算
+ G9 d4 ?$ U3 [3 s★细胞计数板计数法 , U% h) R( x! `2 t$ Y
★血球计数仪计数法 8 j0 ?9 R x3 x) S0 i" q* C
3、干细胞的定性测定
8 n8 i4 _+ m. k) [- _★培养扩增法
7 g5 @2 s" B. {+ {! L★流式细胞仪检测法,用已知抗原标记后测定。CD34+、CD117+、CD133+、C-kit+、 Sca-1+
$ Z; y% g7 j3 T: M: H) g( C; N, I! _' K" d
负收集混合法1 ^5 ]# F6 v* x$ T7 v
分离的7 t1 ` S$ c3 F; e% l( ]3 F
原理 选择性的除去红细胞、血小板、全部的血浆物质、成熟的白细胞、+ [7 D4 b3 S0 A) Z/ Z6 [5 M
淋巴细胞。保留Lin-细胞8 y3 Z# a9 d2 Y) k+ B( N, K% X! ?
6 m& H6 D5 F" g# Q2 O- q$ i( n4 j$ J
靶细胞表面标记物 无- e* V0 c" ~' `, I4 r& e5 g
收集的靶细胞种类 能收集所有Lin-干细胞/祖细胞
5 B, S' e0 f: T/ r! ^; Y6 R. t& e
9 B/ Q" D2 W5 c4 ~1 `9 t6 Y* ? l6 N最小体积 0.5ml
2 N" _9 s( w5 w! ^动员剂 不需要
6 A$ C- H) c3 n) f0 ?, z血浆残留 无! q" x" d" g# B4 S6 `5 B
分选对象 骨髓、脐带血
3 V. y; G- u9 O5 B0 B细胞& M! [; c2 z! l
回收率 ≥85%
$ g1 j( R7 s, R! W细胞
7 S3 @5 p7 A K5 Z$ `存活率 ≥98% |
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