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- 89
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人骨髓、脐带血分离提取新方法:4 h, B/ k! b: H2 Z' P" c9 O
[分离、纯化后的干细胞检测]
# o' P8 a. \ v( z6 z9 V1、细胞存活率检测:使用溴芬蓝染色法。
+ @4 o1 l5 x# C2、所提取的细胞总数计算
, ^, }' x. @: P, G6 _0 B★细胞计数板计数法 & V' X K6 u: D- A0 E; m
★血球计数仪计数法 1 e3 Z: b0 u$ M! j3 u$ w" j
3、干细胞的定性测定
4 R: H- A" a- [- K3 m★培养扩增法
7 z# D# k M4 s) P2 c4 c$ ^★流式细胞仪检测法,用已知抗原标记后测定。CD34+、CD117+、CD133+、C-kit+、 Sca-1+
: F$ t" N; `( p# \0 s) i
6 v4 L( i: _6 y7 a0 y' e 负收集混合法2 u8 D) \. z7 c6 \
分离的! l$ j: q* x4 x
原理 选择性的除去红细胞、血小板、全部的血浆物质、成熟的白细胞、- p/ _+ C( @' l7 V, o& C7 |
淋巴细胞。保留Lin-细胞
V# n0 K3 M) G) k. R: `3 x8 L' F! P( y/ M0 z$ `" ]
靶细胞表面标记物 无- y8 P3 k$ S3 {' J5 X7 b
收集的靶细胞种类 能收集所有Lin-干细胞/祖细胞% T+ @3 M5 J/ O4 N4 I
- y2 @" c i: I2 D, b' E" e2 U最小体积 0.5ml1 Y1 o7 y1 y5 x f+ E' t1 U
动员剂 不需要8 ]* \" l. k) M$ q& [% n
血浆残留 无* B* p0 i0 H) D" r3 X
分选对象 骨髓、脐带血; }% G1 Z6 S% {% n; v, Z9 t+ X
细胞% H$ J* n5 x( g" [) h3 g0 s/ w
回收率 ≥85%& ]) n+ v3 b! A+ x- L+ k
细胞
6 E4 _$ e' l( j3 J存活率 ≥98% |
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