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人骨髓、脐带血分离提取新方法:
* C) e$ }- G- m! L4 L' \[分离、纯化后的干细胞检测]
( ~5 H# B! ^" F1、细胞存活率检测:使用溴芬蓝染色法。 - O2 v" y' }& _5 l9 A# J. e
2、所提取的细胞总数计算
. ^% {* q4 z4 m, ?- v- k6 M# w4 D★细胞计数板计数法
' C7 x& m4 c, F3 J★血球计数仪计数法
8 o% B: r3 C7 P3 \3、干细胞的定性测定
: [' f; V' X7 `1 X% g★培养扩增法 6 I7 e# k2 A; G) D8 V
★流式细胞仪检测法,用已知抗原标记后测定。CD34+、CD117+、CD133+、C-kit+、 Sca-1+
5 A' [/ C6 X( c6 e1 w# {. A, x9 K) x) g- o! V+ Q
负收集混合法 r- z, `. M7 ?5 K+ y7 A
分离的' m: H' A# q4 t
原理 选择性的除去红细胞、血小板、全部的血浆物质、成熟的白细胞、3 j' Q9 {! ~3 _& }7 a7 n- j
淋巴细胞。保留Lin-细胞
( A/ N7 O+ W X7 e" m
* g& }/ y% v/ V1 q B7 m5 ?靶细胞表面标记物 无
/ O7 R# r$ n" |0 V# S收集的靶细胞种类 能收集所有Lin-干细胞/祖细胞6 d, \% W9 H, j1 j+ f; [5 l. z( i( }
3 R, o. h' I+ N$ t9 O5 D
最小体积 0.5ml
) J9 d6 Y: l( ^+ J ]' L动员剂 不需要, ?; |: w6 W: n/ k
血浆残留 无! Y. x$ D7 e; ]* `$ f
分选对象 骨髓、脐带血
% Z1 Y- X1 ?" l; I* A! q细胞
$ |) k% y& D6 h- _* G2 S回收率 ≥85%) j$ `% O* e8 M" j- Z+ K& w3 [
细胞' ?6 [* H! w3 i) q( V4 r7 X& [
存活率 ≥98% |
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