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- 89
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人骨髓、脐带血分离提取新方法:
6 [( m% R- o0 B( a7 c: F( v[分离、纯化后的干细胞检测]
4 c* }, b/ i6 s2 }1、细胞存活率检测:使用溴芬蓝染色法。
3 C$ |4 C# i0 U! e2、所提取的细胞总数计算 ! L2 Z) G- i, d5 Y6 I, j3 T2 Z! P
★细胞计数板计数法 : ^ c* ]. L/ S/ t; b1 \- L: e
★血球计数仪计数法 % p6 @( A, U D' y! ^; B
3、干细胞的定性测定 0 l2 a2 Y1 ?2 A, B/ j0 n6 S* \- c
★培养扩增法
- r, g/ A; R: m$ c" x2 g f5 k: p) {★流式细胞仪检测法,用已知抗原标记后测定。CD34+、CD117+、CD133+、C-kit+、 Sca-1+
: u% B3 g( R. s {0 N2 ~3 N' Q; m0 |4 H1 w4 \) x, ?. F, f. {5 k5 F
负收集混合法
9 r4 n& n4 z! R2 J# N+ F% c3 `分离的0 p2 L9 O1 z* s$ ^- m. M
原理 选择性的除去红细胞、血小板、全部的血浆物质、成熟的白细胞、- `8 A/ |( }7 | X
淋巴细胞。保留Lin-细胞6 t) P2 e2 B+ l3 _- k1 b a
9 e6 m0 q$ B+ M5 u
靶细胞表面标记物 无
3 ?1 Y$ ?, ?' G+ J- O k+ U收集的靶细胞种类 能收集所有Lin-干细胞/祖细胞
2 r( r, l e" q+ [" R+ r. I+ y* A, y) U7 g! a
最小体积 0.5ml# _) x4 z) V$ R- p
动员剂 不需要
& \' x) w5 g- f0 z- ~' F5 \6 N* L血浆残留 无( e$ k8 O' ]1 i. K% p* ]- n
分选对象 骨髓、脐带血
5 J+ k2 F* C! w, w6 d细胞" \( ]5 }' Z: l- P; J: z; h' X0 r
回收率 ≥85%
# _7 ?7 V+ L0 e& P细胞8 r$ a/ W7 Z1 B9 |
存活率 ≥98% |
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