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人骨髓、脐带血分离提取新方法:4 ]7 s0 E! D8 m; i
[分离、纯化后的干细胞检测]
2 _" T( Z6 w5 }/ b. e$ O+ x1、细胞存活率检测:使用溴芬蓝染色法。 . V5 [: i2 }* H* J) J
2、所提取的细胞总数计算
1 I. {8 i+ b# z/ y+ | k★细胞计数板计数法 / l! Z; X3 b) C$ X9 {) B+ x
★血球计数仪计数法
# u4 J3 t1 _0 Y% s8 }3、干细胞的定性测定 , Q& \: @/ `* ]. T. }# q
★培养扩增法 3 \4 m, i# q% K. e/ w
★流式细胞仪检测法,用已知抗原标记后测定。CD34+、CD117+、CD133+、C-kit+、 Sca-1+ }7 Y" q, s7 k; j0 S
2 X6 H5 O! J% A: s! v7 \
负收集混合法
: j( i- @$ F8 G- w" k0 U! j分离的
; u6 W) c7 X f( X原理 选择性的除去红细胞、血小板、全部的血浆物质、成熟的白细胞、- @4 O1 w. W+ E1 m% E
淋巴细胞。保留Lin-细胞
& m H- i. Y- J* L" c2 l. c! x$ B, {4 r5 N" ^
靶细胞表面标记物 无6 F& K- _0 i8 z( o
收集的靶细胞种类 能收集所有Lin-干细胞/祖细胞
1 ?2 c9 u) C. [+ ^6 P2 Y5 m; p: }$ D" v& O8 Q
最小体积 0.5ml
+ A# S" R' U# }, I/ ^5 g动员剂 不需要& z' y0 v( K" n6 `$ H4 V! V
血浆残留 无
7 O$ X) }1 g% n% O5 E; J& K分选对象 骨髓、脐带血; V3 E) ~7 X, K3 o2 V
细胞4 k( m# _0 [7 @ y# ^' W1 w1 @- C
回收率 ≥85%
8 X& ?5 c) j5 [6 j& ]细胞" q/ m2 n0 C0 T3 s3 ]
存活率 ≥98% |
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