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人骨髓、脐带血分离提取新方法:
5 P p) O: ^% e5 l7 Q4 C0 B8 V4 }[分离、纯化后的干细胞检测] / m1 k% C4 n* T7 G3 P, S# v
1、细胞存活率检测:使用溴芬蓝染色法。 0 `2 q+ c! ^9 h6 `
2、所提取的细胞总数计算
; _8 m0 _3 F* Y) z6 o★细胞计数板计数法 ( b- @+ }% S' z3 L
★血球计数仪计数法
z5 o |: r; _% `3、干细胞的定性测定
- t) U$ s, h& \6 p$ ]- i6 }★培养扩增法
0 X& @' i p5 o! l/ S: ~' E. O) e★流式细胞仪检测法,用已知抗原标记后测定。CD34+、CD117+、CD133+、C-kit+、 Sca-1+
+ w! h# M* A" W+ F) Y9 ~: s' U4 k/ t- k6 B6 a: T$ q
负收集混合法0 A; r9 ^2 ^. {( t+ y/ q
分离的
. r# [: }$ h: \* ]" K# t* M7 h原理 选择性的除去红细胞、血小板、全部的血浆物质、成熟的白细胞、
; |1 D+ U# ]3 H1 V. v* K+ {! B# o% X淋巴细胞。保留Lin-细胞
4 R) e: R; F' n6 b; a1 O: ]( `& C2 E h! @9 M! N
靶细胞表面标记物 无
6 h' S& G1 Y; @收集的靶细胞种类 能收集所有Lin-干细胞/祖细胞% J3 D) [; }+ r7 Z( b, J- f- W
) j' @% c( ]5 f m/ ^6 m最小体积 0.5ml
1 x O0 G D; L1 m& N$ n9 t动员剂 不需要7 ^: n$ }; ]' l9 c6 ~8 ?4 f
血浆残留 无 _* x" m- t* X# r6 [4 c* O! I
分选对象 骨髓、脐带血( b: C* a* n! c9 Y+ o
细胞8 m/ m- o- S# H, `+ X5 C% ^" q
回收率 ≥85%) Y: j+ c/ \2 f+ S1 V. W% f* e" [
细胞
# v' f% a8 w" |9 e k+ [存活率 ≥98% |
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