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培养的脐带源间充质干细胞做流式检测总是不合格,这是怎么回事?   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-3-2 10:37 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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分离出来的MSC,经过一段时间传代,P1代做流式检测,不合格,P2代也不合格,是因为代数太少,细胞纯度不够吗?

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沙发
发表于 2015-3-2 10:49 |只看该作者
问题太笼统了,流式不合格有哪些项不合格啊,说的具体点。
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藤椅
发表于 2015-3-2 10:52 |只看该作者
干细胞要养到三代以后纯度才可以,至于你说的问题真的太笼统了,没法解答
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板凳
发表于 2015-3-2 16:06 |只看该作者
回复 309208770 的帖子
% M) s# c2 P3 Q
% c' T* J& f, S1 w' T你是用什么方法分离的?消化法or组织贴壁法?我们用组织贴壁法分离得到的间充质干细胞在p1代就能检测合格(CD73、90、105、166阳性率大于等于95%以上,CD34、45、HLADR阴性小于等于5%)
$ ~  T. j* o7 k3 @% r
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报纸
发表于 2015-3-3 10:44 |只看该作者
这要看你使用什么方法分离的MSC,包括血管和外层羊膜的去除情况;如果是刚接触的话可以再反复锻炼几次拨胶的手法,如果一切正常的话,基本上阳性结果都能在95%以上,很多时候都均在98%以上
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地板
发表于 2015-3-3 17:01 |只看该作者
脐带组织块贴壁生长前要进行处理,主要是除去血管,更严格的办法要去掉外面的皮,只剩华通氏胶。
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7楼
发表于 2015-3-4 09:05 |只看该作者
请上图,帮你分析。0 m: i$ ]+ L: g- Y% [& M' n
我们实验室做的,不论消化法,还是组织块法得到的MSC,在P1代阳性标志物都大于95%,阴性标志物小于2%。
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8楼
发表于 2015-3-4 13:08 |只看该作者
具体得看你怎么分的吧,还有哪个指标不合格···具体问题具体分析··· 反正去血管去膜的华通氏胶爬出来的,基本都可以过关。
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9楼
发表于 2015-3-9 08:37 |只看该作者
回复 cloudycity 的帖子
" q% K( U: M8 V9 P) C; }- @# l* ]+ a% b* B. b0 n; |0 T' q
组织块贴壁法,直接剪碎就摆在培养瓶上了,去血管的方法使用止血钳将血管剥离开吗?我也曾经试过,但是操作不好,现在想想可能就是方法太粗糙导致杂细胞太多了
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10楼
发表于 2015-3-9 08:38 |只看该作者
回复 fduhoward 的帖子% i) T4 Z3 x/ Y

" d; A) |; O$ p  Q怎么样除去血管?止血钳剥离吗?
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