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求教paraformaldehyde (PFA)-fixed MSC 这是什么意思?记得共培养是用丝裂霉素处理? [复制链接]

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发表于 2015-3-18 08:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2015-3-18 10:03 编辑
- D* F) a9 A6 s: v( y' D2 u- y& U) T0 ~$ f; Y8 }
Carboxyfl uorescein succinimidyl ester (CFSE;
. O5 w+ X' a8 f# L0 QInvitrogen)-labeled PBMC were cultured at
3 r5 Y" ^, G2 E$ y400 000 cells/well in a 24-well plate with cultured,
) S$ O( n" A' q2 t7 {freshly thawed or paraformaldehyde (PFA)-fi xed  a6 a" {: {  x4 A% C. [) r& T
MSC at a ratio of MSC:PBMC of 1:3 and 1:9. T
. a, \& e% A5 T+ J4 Q, \6 A1 ilymphocytes were stimulated using 0.4 μ g/mL antihuman
5 H" R1 d9 Q/ ^# \, ZCD3 and CD28 antibodies (clone HIT3a4 e: ?5 b4 L$ V5 K9 R7 }& U
and CD28.2, respectively, from BD Pharmagen,
0 ^9 [1 U& S' W% [0 S& y, I) }Mississauga, ON, Canada). T-cell proliferation was
( N' ~' N1 }8 ^8 zdetermined 4 days later by fl ow cytometry analysis! b. c, {5 G6 J( L. F3 A
of CFSE fl uorescence intensity.
: A# f* b* H4 C7 h& a0 W2 }% N& I" t  j& I9 @
paraformaldehyde (PFA)-fixed MSC 这是什么意思?记得共培养是用丝裂霉素处理?
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沙发
发表于 2015-3-18 09:40 |只看该作者
丝裂霉素是处理PBMC的吧。
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藤椅
发表于 2015-3-18 10:13 |只看该作者
回复 cleargreat 的帖子) _: u/ r9 C% g% }0 J6 E; n, p, I
9 h3 @2 G# ^7 K1 ?/ c$ e4 q
如果用丝裂霉素处理PBMC的话,怎么研究MSC对PBMC的增值抑制作用
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板凳
发表于 2015-3-18 10:31 |只看该作者
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这说的是PFA固定过的MSC吧···3 ~* N, w2 L% S+ F. c7 c- }* g
但是一般灭活都是用丝裂霉素或是射线灭活,PFA还真没用过···
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发表于 2015-3-18 11:22 |只看该作者
回复 cloudycity 的帖子
& _2 w6 L( D" x& o. H% J, @6 t$ L5 \! C2 L, D
MSC为何要用PFA固定呢?
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