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求教paraformaldehyde (PFA)-fixed MSC 这是什么意思?记得共培养是用丝裂霉素处理? [复制链接]

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发表于 2015-3-18 08:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2015-3-18 10:03 编辑
5 C9 V/ I6 m6 Q% R% o* Z: i. |" `% M  I- ~& T5 |' K
Carboxyfl uorescein succinimidyl ester (CFSE;
7 X9 Z& s! l  s: z+ g+ `8 r  ZInvitrogen)-labeled PBMC were cultured at4 H% B5 G& ?, o+ o( {
400 000 cells/well in a 24-well plate with cultured,; o+ A1 C/ x, ?: |
freshly thawed or paraformaldehyde (PFA)-fi xed- Y0 c, K' [0 N$ R+ G# ]0 |
MSC at a ratio of MSC:PBMC of 1:3 and 1:9. T
& p5 H* |2 \+ S, f, m! K: Plymphocytes were stimulated using 0.4 μ g/mL antihuman$ p4 j; l! G: w
CD3 and CD28 antibodies (clone HIT3a
& M) w" J6 M0 c# Land CD28.2, respectively, from BD Pharmagen,
5 R0 `  p4 z/ e' W/ `Mississauga, ON, Canada). T-cell proliferation was1 ]% k' X4 A0 n! T" [
determined 4 days later by fl ow cytometry analysis+ p8 l# ~+ x& O$ [5 e  W
of CFSE fl uorescence intensity.
8 Q9 X: C3 |( L# G! a* Z& [$ n1 C: Y5 n0 q% B& p5 `. K
paraformaldehyde (PFA)-fixed MSC 这是什么意思?记得共培养是用丝裂霉素处理?
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沙发
发表于 2015-3-18 09:40 |只看该作者
丝裂霉素是处理PBMC的吧。
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藤椅
发表于 2015-3-18 10:13 |只看该作者
回复 cleargreat 的帖子
* S) q9 e2 ~8 n9 @, W% }* s3 ~
) _! A- M2 {+ m6 |0 z! V如果用丝裂霉素处理PBMC的话,怎么研究MSC对PBMC的增值抑制作用
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发表于 2015-3-18 10:31 |只看该作者
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这说的是PFA固定过的MSC吧···$ r/ M8 f/ T0 Q. ?
但是一般灭活都是用丝裂霉素或是射线灭活,PFA还真没用过···
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报纸
发表于 2015-3-18 11:22 |只看该作者
回复 cloudycity 的帖子0 s: n/ S5 i- D- ]! g

+ t# c! W1 J* F* s- m. UMSC为何要用PFA固定呢?
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