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求教paraformaldehyde (PFA)-fixed MSC 这是什么意思?记得共培养是用丝裂霉素处理? [复制链接]

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发表于 2015-3-18 08:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2015-3-18 10:03 编辑
1 U8 K2 O2 s1 |( x
2 ^! M, [, M: VCarboxyfl uorescein succinimidyl ester (CFSE;5 T& B; ^5 q' M  _5 T( R
Invitrogen)-labeled PBMC were cultured at& `. O+ f2 g4 k- T' g/ M8 m
400 000 cells/well in a 24-well plate with cultured,
7 o; e, ]7 P& i2 k! Ufreshly thawed or paraformaldehyde (PFA)-fi xed
2 o3 X6 p: Y% T: h& jMSC at a ratio of MSC:PBMC of 1:3 and 1:9. T
7 U  G7 y1 j5 g$ olymphocytes were stimulated using 0.4 μ g/mL antihuman- }- D: j# y, w4 w( j
CD3 and CD28 antibodies (clone HIT3a* x5 L  f' t+ F- E6 v
and CD28.2, respectively, from BD Pharmagen,$ M. h) B+ K7 p, ~' v
Mississauga, ON, Canada). T-cell proliferation was
6 n3 H3 e+ K1 Z" u, h! Mdetermined 4 days later by fl ow cytometry analysis  w7 q: H# D) d4 ~8 ^% q# w. Y
of CFSE fl uorescence intensity.% {- v, Y! b: w* {1 Y

; r+ v  `4 P+ Tparaformaldehyde (PFA)-fixed MSC 这是什么意思?记得共培养是用丝裂霉素处理?
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沙发
发表于 2015-3-18 09:40 |只看该作者
丝裂霉素是处理PBMC的吧。
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藤椅
发表于 2015-3-18 10:13 |只看该作者
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4 T: v8 _! G6 m5 S) z( r  N: C: C7 D. l1 W
如果用丝裂霉素处理PBMC的话,怎么研究MSC对PBMC的增值抑制作用
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板凳
发表于 2015-3-18 10:31 |只看该作者
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这说的是PFA固定过的MSC吧···' x; O% U) J+ i( c/ W1 e9 Y
但是一般灭活都是用丝裂霉素或是射线灭活,PFA还真没用过···
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报纸
发表于 2015-3-18 11:22 |只看该作者
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% C6 r  ]; R! O* c. s- T$ C' J/ T, `1 @, v  h9 O7 m& d
MSC为何要用PFA固定呢?
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