[求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题

nailute1985

由于小弟近期准备做NK细胞的体外扩增培养，之前没有接触过有关方面的问题，希望有实验经验的大神给予回答谢谢。
, U, w: r- t! Z1 K! }1、如果做探索实验的话 外周血的用血量最小可以是多少？对分离PBMC的实验部分 ficoll分离法是不是最优秀的？
0 C7 {; m- ]2 z! i; G8 t* X2、在加入NK细胞刺激因子的时候需不需要加入K562肿瘤细胞株，因为有文献说K562可以提高NK扩增的效率。: F8 U5 J/ Q* T; u
3、刺激因子除了IL-2,IL-15,需要加CD3单抗么？
7 b. ]4 v" i& ~' ]: n, q7 ?- ?4、培养基选择，针对NK细胞的培养基哪个是最好的？XVIVO15?1640或者是其他？
$ ]* x) v# B" e5 E, b3 k' H/ }6 k$ b5、杀伤性实验LDH方法可否？

奇幻雪蓝

1.你是做学术研究还是临床治疗，如果是学术研究，上面的都可以试；
4 A+ o* g; E! A2.如果是临床治疗，就不要加入肿瘤细胞株了，其他的请和医生沟通！

Ernest

20ml外周血，15ml分离单个核，5ml制备血清

nailute1985

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# B: n. V; v& X) R- u
9 B- ^" b0 u( b8 C什么意思？
0 c$ Y0 x# Q/ `5 X- O, P
! K# c2 h0 t7 U

syj7888

K562肿瘤细胞株，现在有公司用来培养NK细胞进行治疗的，工程细胞培养法

nailute1985

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- R( W$ P2 N( w+ f9 \* H3 r6 d- `9 h1 Q" l7 f- Y7 C
用于细胞治疗的NK细胞体外扩增实验，用K562细胞刺激会不会在回输的时候对病人有风险？或者是在扩增出来后需要用射线杀死K562?

suning5

IL-2，IL-4，IL-7及IL-12等细胞因子，显著提高增殖能力

suning5

IL-2，IL-4，IL-7及IL-12等细胞因子，显著提高增殖能力

nan_yu1695

也摸索了很久，只加各类白介素没有成功过