[求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题

nailute1985

由于小弟近期准备做NK细胞的体外扩增培养，之前没有接触过有关方面的问题，希望有实验经验的大神给予回答谢谢。' T4 i( B  C' w, m7 O& F. ]" G5 C3 v
1、如果做探索实验的话 外周血的用血量最小可以是多少？对分离PBMC的实验部分 ficoll分离法是不是最优秀的？5 W' @6 m' `& \: a
2、在加入NK细胞刺激因子的时候需不需要加入K562肿瘤细胞株，因为有文献说K562可以提高NK扩增的效率。% c0 y- B! y* W. D1 Q9 {) q  m# O  B; t
3、刺激因子除了IL-2,IL-15,需要加CD3单抗么？9 e- y* \. e  _2 j9 K
4、培养基选择，针对NK细胞的培养基哪个是最好的？XVIVO15?1640或者是其他？- F) W* Q# R8 P0 g
5、杀伤性实验LDH方法可否？

奇幻雪蓝

1.你是做学术研究还是临床治疗，如果是学术研究，上面的都可以试；# E. B/ r& I) Y% U  Y
2.如果是临床治疗，就不要加入肿瘤细胞株了，其他的请和医生沟通！

Ernest

20ml外周血，15ml分离单个核，5ml制备血清

nailute1985

回复 Ernest 的帖子/ S# ^8 N5 h- d; G
3 b0 S8 C9 j' B
什么意思？  s6 S+ Y1 R1 h

9 g- H, ^. z  k, E1 U$ x6 a- F5 O

syj7888

K562肿瘤细胞株，现在有公司用来培养NK细胞进行治疗的，工程细胞培养法

nailute1985

回复 syj7888 的帖子
% _/ s) ^# l1 Y: S7 j, Q/ U/ q' P3 t& @& B; N6 d# \/ j. M; P
用于细胞治疗的NK细胞体外扩增实验，用K562细胞刺激会不会在回输的时候对病人有风险？或者是在扩增出来后需要用射线杀死K562?

suning5

IL-2，IL-4，IL-7及IL-12等细胞因子，显著提高增殖能力

suning5

IL-2，IL-4，IL-7及IL-12等细胞因子，显著提高增殖能力

nan_yu1695

也摸索了很久，只加各类白介素没有成功过