[求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题

nailute1985

由于小弟近期准备做NK细胞的体外扩增培养，之前没有接触过有关方面的问题，希望有实验经验的大神给予回答谢谢。
! t: m+ c9 P" s6 A/ S! f1、如果做探索实验的话 外周血的用血量最小可以是多少？对分离PBMC的实验部分 ficoll分离法是不是最优秀的？  Z3 M% G2 B8 M: K% S  G' T( Q
2、在加入NK细胞刺激因子的时候需不需要加入K562肿瘤细胞株，因为有文献说K562可以提高NK扩增的效率。
$ T1 ~) N: I4 ?' c1 `3、刺激因子除了IL-2,IL-15,需要加CD3单抗么？
4 a/ g& E; i) p# C4、培养基选择，针对NK细胞的培养基哪个是最好的？XVIVO15?1640或者是其他？8 V% \5 o9 I7 O
5、杀伤性实验LDH方法可否？

奇幻雪蓝

1.你是做学术研究还是临床治疗，如果是学术研究，上面的都可以试；  ~$ D) d0 T. m7 H
2.如果是临床治疗，就不要加入肿瘤细胞株了，其他的请和医生沟通！

Ernest

20ml外周血，15ml分离单个核，5ml制备血清

nailute1985

回复 Ernest 的帖子
% `1 C% b" U7 b* h: ?0 \" @/ Q  f% m) _- t" o' C+ O. u, p
什么意思？# E; J  ]1 ?: e) X# j7 {+ L
* y" Q0 q$ y- Q% R) q) E  i3 D

syj7888

K562肿瘤细胞株，现在有公司用来培养NK细胞进行治疗的，工程细胞培养法

nailute1985

回复 syj7888 的帖子# i3 W% h8 @& j* x3 h* S

9 @0 R& B$ J( o8 j, X用于细胞治疗的NK细胞体外扩增实验，用K562细胞刺激会不会在回输的时候对病人有风险？或者是在扩增出来后需要用射线杀死K562?

suning5

IL-2，IL-4，IL-7及IL-12等细胞因子，显著提高增殖能力

suning5

IL-2，IL-4，IL-7及IL-12等细胞因子，显著提高增殖能力

nan_yu1695

也摸索了很久，只加各类白介素没有成功过