[求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题

nailute1985

由于小弟近期准备做NK细胞的体外扩增培养，之前没有接触过有关方面的问题，希望有实验经验的大神给予回答谢谢。3 P" b8 t, I) P+ U, C& \0 z: f' h6 I
1、如果做探索实验的话 外周血的用血量最小可以是多少？对分离PBMC的实验部分 ficoll分离法是不是最优秀的？
# E+ c+ I4 w+ {' ?$ }2 K2、在加入NK细胞刺激因子的时候需不需要加入K562肿瘤细胞株，因为有文献说K562可以提高NK扩增的效率。
' T) d+ w4 O8 B$ d8 r0 b$ o3、刺激因子除了IL-2,IL-15,需要加CD3单抗么？1 z' \" s1 _5 Y- i7 }5 w( w
4、培养基选择，针对NK细胞的培养基哪个是最好的？XVIVO15?1640或者是其他？
; k! }" ?" n  X9 j: r5、杀伤性实验LDH方法可否？

奇幻雪蓝

1.你是做学术研究还是临床治疗，如果是学术研究，上面的都可以试；
' q+ S/ i" k1 V! V. t2.如果是临床治疗，就不要加入肿瘤细胞株了，其他的请和医生沟通！

Ernest

20ml外周血，15ml分离单个核，5ml制备血清

nailute1985

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8 U4 G: p$ P% v! t7 `2 v* L
' T1 u2 c: q: M0 r, r什么意思？
, q; D0 E/ r5 C/ S' |/ z
3 T- @* D# c2 f  @6 `9 G9 Y& A% f

syj7888

K562肿瘤细胞株，现在有公司用来培养NK细胞进行治疗的，工程细胞培养法

nailute1985

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, L% k- S, B1 p# Z% t0 @" Y) {1 S4 C$ m+ V# r( U' V1 N
用于细胞治疗的NK细胞体外扩增实验，用K562细胞刺激会不会在回输的时候对病人有风险？或者是在扩增出来后需要用射线杀死K562?

suning5

IL-2，IL-4，IL-7及IL-12等细胞因子，显著提高增殖能力

suning5

IL-2，IL-4，IL-7及IL-12等细胞因子，显著提高增殖能力

nan_yu1695

也摸索了很久，只加各类白介素没有成功过