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[求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题 [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2015-3-25 10:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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由于小弟近期准备做NK细胞的体外扩增培养,之前没有接触过有关方面的问题,希望有实验经验的大神给予回答谢谢。1 `. q0 ?; c! O. a! H# W' Y$ K
1、如果做探索实验的话 外周血的用血量最小可以是多少?对分离PBMC的实验部分 ficoll分离法是不是最优秀的?7 @# l0 d) ^0 f2 A, b  Q
2、在加入NK细胞刺激因子的时候需不需要加入K562肿瘤细胞株,因为有文献说K562可以提高NK扩增的效率。
& v' t+ H3 S8 I+ i( H. x3 P% \3、刺激因子除了IL-2,IL-15,需要加CD3单抗么?2 r* s& ~0 l4 E0 w1 ]5 n# \
4、培养基选择,针对NK细胞的培养基哪个是最好的?XVIVO15?1640或者是其他?5 U3 J1 M5 k' \: [
5、杀伤性实验LDH方法可否?
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沙发
发表于 2015-3-25 14:46 |只看该作者
1.你是做学术研究还是临床治疗,如果是学术研究,上面的都可以试;
1 N/ D; o4 ~% }% A8 p2.如果是临床治疗,就不要加入肿瘤细胞株了,其他的请和医生沟通!
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藤椅
发表于 2015-3-27 10:42 |只看该作者
20ml外周血,15ml分离单个核,5ml制备血清

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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2015-3-27 10:45 |只看该作者
回复 Ernest 的帖子/ F% F9 y4 G8 f0 \( s1 L

: W: z9 b8 H' |什么意思?
" a) [2 U& Z& W& b! a9 l+ m# P$ `4 Y
9 ?7 l7 o3 l" Y$ m6 v  v( Z7 P/ z

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报纸
发表于 2015-3-27 11:21 |只看该作者
K562肿瘤细胞株,现在有公司用来培养NK细胞进行治疗的,工程细胞培养法
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地板
发表于 2015-3-27 13:47 |只看该作者
回复 syj7888 的帖子# x- G' \9 I9 @3 x) r) q

, o# i  v( n0 O  _" K/ P; n用于细胞治疗的NK细胞体外扩增实验,用K562细胞刺激会不会在回输的时候对病人有风险?或者是在扩增出来后需要用射线杀死K562?
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发表于 2015-3-31 10:01 |只看该作者
IL-2,IL-4,IL-7及IL-12等细胞因子,显著提高增殖能力
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发表于 2015-3-31 10:01 |只看该作者
IL-2,IL-4,IL-7及IL-12等细胞因子,显著提高增殖能力

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发表于 2016-7-21 09:56 |只看该作者
也摸索了很久,只加各类白介素没有成功过
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