关于Crispr/cas9的问题

thinktank

大家好，我有个关于Crispr/cas9矫正基因的疑问，就是它只能以注射入受精卵的方式进行精确治疗，而不能在得病的个体上发挥作用吗？比如说现在有个病人有个基因发生了突变，而且这个突变引起了某一器官的畸形，那么如果用Crispr/cas9来治疗的话，可以先将该器官、组织的细胞进行培养然后用显微注射入Crispr/cas9，再将矫正后的培养的组织或者器官移植到病人身上，不知道这样理解对不对，恳请大家不吝赐教，谢谢了！！

wmzam2015

怎么说呢。 如果一个人他有显性的遗传疾病，他又不希望自己将来的孩子有，则可以通过Crispr/cas9技术改造精子，卵子（卵子体外培养好像现在的技术还达不到），或受精卵。这是细胞层面的技术，大家都好理解。我认为这是最易实现的，genetic modified 的进化人种将来一定会有，技术上不会很难，5年内暗暗的做，50年后可以光明正大的做。为什么？ 因为仅一个地球，因为污染，后面大家自己填——————。99%的科幻片都可以实现！/ [# Y% \$ O1 x1 k% U6 u7 G0 y
说远了。
6 j, }8 f  w) ^8 k, c对一个人体，human body来说，如果他有血液病，如镰刀贫血，或白细胞癌症，但他没有适合异体移植供体，那可以通过获得他的造血干细胞，Crispr/cas9改造，培养，病人清髓再把改造后的干细胞移植回去。这也是细胞层面的技术，大家都也好理解，而且是体外操作，通过全基因测序即可评估改造后的细胞的安全性。$ ~. F/ `! U8 d6 u. O- K& J/ c2 e' v9 s
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另一个简单例子： HBV病人，肝脏细胞中有cccDNA，要去除，怎么办？ Crispr/cas9技术（RNA也好，蛋白也好，病毒载体也好）需要通过delivery的手段尽可能的靶向到病人的肝脏细胞，还要保证 off taget的安全性, 我想现在没人敢保证，当然 只结合不剪切的Crispr/cas9衍生技术安全性更好，但仅起到转录调节作用。我想在确保安全性和delivery效率（如GalNAc）的条件下，cccDNA会被全部降解的。这是体内的治疗，我想5年或10年内都不会出现。
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thinktank

回复 wmzam2015 的帖子$ N2 N- ]$ a- J+ k( v. ^

( Z) U8 c; x$ u' Q) i谢谢你的回复，看来你对这方面很有了解，我想再请教个问题，就是如果某个病人患了心肌肥大的疾病，现在通过测序的方法也找到了基因突变的地方（比如只有某个基因的某处），那么理论上能不能先通过IPS诱导的方法通过成纤维等细胞获得病人特异的ips，然后对这些IPS进行改造，改造成功后再通过诱导分化为心肌细胞，进行体外重建，最后将改造成功后的心肌进行移植，我想知道这种策略在理论是否合理，是否存在可能性，谢谢！

cyagen

thinktank 发表于 2015-4-3 14:29 9 d6 w& W9 L/ |7 m+ S
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/ |+ M, i3 m: U5 G! C谢谢你的回复，看来你对这方面很有了解，我想再请教个问题，就是如果某个病人患了心 ...

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个人觉得理论是可行的，具体做的难度多大就难以评估了

thinktank

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谢谢你的回复。

wmzam2015

thinktank 发表于 2015-4-3 14:29 6 \- P# p2 h" j1 L$ ~
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! c5 ?: s7 N9 ]' V2 J1 D: I谢谢你的回复，看来你对这方面很有了解，我想再请教个问题，就是如果某个病人患了心 ...

( j4 k' p8 h! ]5 I病人心肌肥大的疾病，我不是很了解。但疾病的分子机理的是很重要：如某个基因突变导致某蛋白表达增多、减少，或突变产生了无功能蛋白、或毒性蛋白。这蛋白的过多表达细胞是仅在心肌，还是其他细胞也有，通过循环到达心肌然后致病。如蛋白缺失而致病，是否通过对病人注射这种蛋白来治疗会更简单些？实际上，同为突变，但致病机理不同，其治疗手段也不同。如有简单方案可用，千万不要选择复杂方案。! l# A- R) X  Y3 u: m
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你的描述理论上可行。类似的有公司（Cardio3 BioSciences）在做临床了（三期），但约有不同，这是现在的技术可以达到的。他们是取hmsc，通过诱导生成Cardiopoietic cell（个人理解为心脏祖细胞），然后注射到心肌中，然后Cardiopoietic cell会修复受损组织。
. W; @, R) a3 p5 z- D) f; J链接如下：http://www.c3bs.com/en/cardiopoiesis-platform。! v& R+ ~4 n! j
如果Cardio3 BioSciences的技术真实可行的话，我想你的方案可以改为用病人自体hmsc，Crispr/cas9改造，诱导为心肌前细胞，然后注射到心脏中。
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thinktank

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, r. y  `# k# l) TThanks a lot, and you are a very responsible person.

cyagen

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如果有需要，我可以介绍公司负责Crispr/cas9技术的科学家与你讨论一下这个问题。

thinktank

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您太负责任了，需要时联系您，谢谢。

jojo1988509

看完了上面，理论可行，但这一块的东西，稍微往前进一点都是重大突破啊！难。