转贴一个问题：关于处理一个6孔板的胚胎成纤维细胞

jason8085

请问大家一个问题哦   我已经用含有血清的培养基配置好了丝裂霉素的溶液   现在想处理一个6孔板的胚胎成纤维细胞，不知道每个孔要加入多少液体呢？处理多长时间呢？

猪笑天

很好

waji_42

谢谢

wangabu

好贴，顶一下，谢了

菲儿

好资料

开心馒头

很好，向高手学习

zpzp0312

3# have-a-rest + o7 j; L7 c9 i  \' ], j: }
呵呵，楼上好主意啊！

have-a-rest

回答正确，有一种懒惰的做法，如果密度合适，PBS洗涤后不用消化，可以直接作为饲养层。

zpzp0312

MMc可以直接溶解在成纤维细胞培养基中，处理时PBS洗涤1遍，加入含有MMc的成纤维细胞培养基，覆盖培养皿底部即可。6 R- H# I# X+ S% m7 S4 X0 [% N
孵育2.5－3小时$ p/ t2 o2 c8 j: d4 R* S# w
PBS彻底洗涤5遍，即可消化成细胞悬液制作饲养层。7 X, t2 a0 V4 k5 y5 ?" U" `' C7 z
建议使用5天以内的，一周以内也可以。! a0 x1 ^! C) B4 J: T1 ^
并且成纤维细胞要使用5代以内的，否则细胞因子的分泌会显著下降！