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[请教] 转贴一个问题:关于处理一个6孔板的胚胎成纤维细胞 [复制链接]

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楼主
发表于 2009-3-27 08:42 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请问大家一个问题哦   我已经用含有血清的培养基配置好了丝裂霉素的溶液   现在想处理一个6孔板的胚胎成纤维细胞,不知道每个孔要加入多少液体呢?处理多长时间呢?

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优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2009-3-27 08:51 |只看该作者
MMc可以直接溶解在成纤维细胞培养基中,处理时PBS洗涤1遍,加入含有MMc的成纤维细胞培养基,覆盖培养皿底部即可。
" O* J* C9 P. q孵育2.5-3小时: @7 {7 A! }& {1 S5 c
PBS彻底洗涤5遍,即可消化成细胞悬液制作饲养层。
7 o$ G3 i% H# x$ ~% a建议使用5天以内的,一周以内也可以。
& }. A( ^6 l, Y2 D' L! b* s4 F并且成纤维细胞要使用5代以内的,否则细胞因子的分泌会显著下降!

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优秀会员 金话筒

藤椅
发表于 2009-3-28 10:50 |只看该作者
回答正确,有一种懒惰的做法,如果密度合适,PBS洗涤后不用消化,可以直接作为饲养层。

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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2009-3-29 10:21 |只看该作者
3# have-a-rest
1 @7 p! j8 f) Y; b& u! Y呵呵,楼上好主意啊!

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报纸
发表于 2009-3-30 23:01 |只看该作者
很好,向高手学习

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地板
发表于 2009-3-31 09:20 |只看该作者
好资料

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7楼
发表于 2009-4-19 08:14 |只看该作者
好贴,顶一下,谢了

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8楼
发表于 2009-4-20 08:12 |只看该作者
谢谢

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9楼
发表于 2009-4-22 12:41 |只看该作者
很好
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