用什么牌子的淋巴分离液分离脐血单个核细胞？

小梓莜

大家好！最近在分离脐带血中的单个核细胞，方法为：淋巴分离液：脐带血=1:2，2000rpm，30min.离心后发现有很多红细胞存在在白膜层，不知该如何解决，是分离液的关系？还是要提高离心力？再或者是延长离心时间？希望各位大侠帮忙指导，谢谢

小梓莜

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2 {! {1 D' x& o, E9 U+ s  v$ k您好！谢谢你的建议，我也听说GE淋巴分离液效果好，以后试试，想问下您那边做脐血单个核细胞分离，脐血一般存放多长时间，15h吗，或是更短？谢谢指教！

小梓莜

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7 K; l( I( a7 |! `您好！谢谢这么详细的讲解，我讲讲我们这边的情况：
" E0 U; }: g6 }& U' q, N1 _1、离心机是热电牌子的，升9降3，曾经试过升9降0，感觉没啥太大差别; K0 k& {9 A5 d* N/ X& I
2、因为我做的是脐带血，时间一般都超过12h才能开始分离，最好的时候也要15h了，所以血液放置太久了
4 T) L" e6 }) L6 }! X0 z0 }( i  `7 F3、用50ml离心管，15ml的淋巴细胞分离液，加30ml血液，每次分离结果白膜层中都会有红细胞参在其中，只多不少。

小梓莜

回复 mania7041 的帖子. l3 z. i+ q6 k4 g  b

; s/ Y5 ~* ~/ n0 |5 D& \8 H5 g想问下你那边脐带血一般放置多久进行分离？分离的效果如何，单个核细胞数目多少？谢谢参与讨论~

小梓莜

回复 hk456 的帖子
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谢谢回复~~

小梓莜

回复 chenlin080102 的帖子
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9 w8 N' P0 Q7 g* N# \- v6 a# r您好！我目前离心效果好了点，留在白膜层中的红细胞减少了很多，剩下部分会再用红细胞裂解液裂解，不知您那边是如何优化的呢？改变离心转速？还是延长离心时间？谢谢您的指教。

小梓莜

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好的，谢谢您的指导，我去查查~

小梓莜

回复 dchingb 的帖子3 K2 E! |/ I, z

: R$ F( E2 Z$ ]* `9 |! y你好！我有用PBS等比稀释，分离液为1.077g/ml。

小梓莜

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% M, Z. a; H- p8 @$ T- L
5 a' l3 Q' ^  U7 _" |" b谢谢，我再优化条件试试~

小梓莜

回复 chenlin080102 的帖子: F& ]  k2 }) r" @: N
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谢谢，我再优化条件试试~