胎盘间充质干细胞培养问题

caustic

我们的胎盘用组织分离器分离完后，在进行酶消化，再用100um的无菌滤网过滤，最后得到数量很多的细胞悬液，可进行进一步的细胞培养，但问题是每次的细胞活性都不高，都只有2%左右，还是保守估计，请问有哪位高手知道 就细胞活性这个问题有什么好的办法？

小小龙001

具体的步骤太模糊，有没有可能是酶浓度或者活性的问题，或者是换液的问题

caustic

回复 小小龙001 的帖子( f  k% x2 N& f( u

( A6 |: U' M4 h2%是分离后的细胞活性  每次用酶法消化得到的细胞悬液测试活性 都在2%左右& ?; y$ f1 k) {

hsu86

过程表述不清啊，. z% X* F9 A1 _! H1 y
1. 你看下消化时间是不是太长了，酶消化的同时对细胞也有伤害，消化完毕最先得到的细胞可能已经活性很低甚至死亡了
3 u. e7 W7 r; r7 c2. 细胞很多那么种植密度和培养液选择是否达到细胞生长要求- E* ~3 H+ r# p! ], w
过程中的吹打次数力度也要掌握的，液体的剪切力对细胞影响很大的* v9 w6 v8 I! m, D! t0 h* K

yuanyecat

1 l5 R8 q5 R4 l: M& U' A8 x

7 g; c) d# H' R. I& |  w你是用哪种酶消化的。不要用强力的酶比如trypsine。可以考虑活性弱些的。另外消化时间也会对细胞活力有影响。

dmz

可以选择用组织块培养的方法

dchingb

應該是酶消化的濃度和作用時間造成的，無菌過濾時的壓力與流速也不能太大

youyang

为什么不用组织块贴壁法呢？