这一份外周血CIK养得匪夷所思....求大神解惑....Orz

baby00000003

5 z2 ~* p$ L9 _3 \! R( i
, P) x1 X2 G+ y0 F还是先上图吧..
; R3 a+ ]% S5 n. |2 T5 N, c) {5 d3 ^: l/ Z/ W1 e& Q+ M
流式检测CIK表面标志，CD3/CD56，如上图- ^1 h1 z9 O6 i7 e  k- {0 [

5 n  d0 h5 r) F9 }- Q# e' u这是同一来源，培养至D14和混合DC培养至D5的外周血CIK% h9 r6 m) |' w) p3 W, K5 V9 O
细胞增殖速率、观察形态没有特别异常，但单独培养的CIK中CD3+比例仅有75%，CD3+/CD56+比例~13%；混合培养组中上述比例仅为60%和2%+ Y! c1 |" d8 ?$ T  v; j7 b. s
就细胞形态而言，混合培养组细胞可见体积增大及细胞内分泌颗粒增加，这应该是细胞成熟的形态变化（个人理解）" u3 e1 {0 |9 `& z7 Q3 `# \
- M. u* }" R3 h1 b0 \
想请教各位老师，为什么随着CIK细胞的成熟，CD56+比例反而降低了很多呢，甚至比单独培养的CIK更低？, k+ J6 C3 C' V- D
再上个混合培养的CIK照片吧，各位老师看看可有什么异常？! a" P6 T  v1 _7 y6 g  O

/ u  N* G0 h# Y* m' F混合D0/ G! `  }" z8 p0 n6 y9 ~1 s# B

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2 A7 h% }" E1 L# e, a这2个是混合D41 A8 ?9 W+ M2 k$ Q% J6 |
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附加信息，样本来源为30岁男性，健康状况良好，无不良嗜好或非常规工作生活时间
" f" B/ D6 c# }4 c$ U5 m3 ^

snowny007

同求，个人也做过DC+CIK混合培养实验，混合后，双阳性比率略有增加，但细胞增殖数量却不如CIK单独培养。$ q! X8 y7 D; B3 B6 I2 ?7 r

lyj-0017

回复 baby00000003 的帖子) T( F1 L/ R  `* Z  ~: y7 E) N
  o$ v1 P: E7 p9 L
没有混合培养过，不是太懂。以前见过夏建川的课件里也有混合培养的流式检测图，他那个混合培养的细胞中CD3+CD56+的比例也不高，还不到4%。我建议你做个平行试验，再将两组细胞分别进行检测看看。

baby00000003

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: N- Y" _" M$ \. {: f0 j9 @3 s8 G
8 h) B$ Y4 M# w可是之前混合培养的CD3+/CD56+都能到40%以上呢......困惑ing...

lyj-0017

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2 M: |- e4 N5 X3 \$ m) Z6 }
: I( J) V9 t# Z( V- J6 s' t% r4 C8 M: F我CIK单独培养有的患者都能达到60%多来，那还比你这个混合培养的好很多，所以说，混合培养相对于单一培养没有什么优势，况且患者也存在个体差异的问题。

hsu86

理论上混合培养能刺激双阳性的比例，但是在实际培养中发现单独培养的CIK不必混合培养的差，而且单独培养的CIK杀伤实验结果也不必混合培养的差。4 h  N: G% @( l/ o  p
就图片而言细胞形态是趋向于成熟的6 z2 m* k4 v9 v% B6 \7 }
当然我没有用抗原刺激DC细胞，不知道是否是这个原因。