这一份外周血CIK养得匪夷所思....求大神解惑....Orz

baby00000003

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, z6 U- s- n) U; ^7 ?还是先上图吧..2 _7 w& v. z9 r0 ]8 K
; D1 O. N  K) o
流式检测CIK表面标志，CD3/CD56，如上图
; Z6 M* o2 a5 [1 _7 _3 q% n( \* \/ Z2 b; v& u
这是同一来源，培养至D14和混合DC培养至D5的外周血CIK! L' |' k8 [$ w- F/ }
细胞增殖速率、观察形态没有特别异常，但单独培养的CIK中CD3+比例仅有75%，CD3+/CD56+比例~13%；混合培养组中上述比例仅为60%和2%
( l( v" L' x; k就细胞形态而言，混合培养组细胞可见体积增大及细胞内分泌颗粒增加，这应该是细胞成熟的形态变化（个人理解）# U1 f; @; Q4 x6 z- ^- q6 y

' Q9 c' H" s) e/ @" F; s! v想请教各位老师，为什么随着CIK细胞的成熟，CD56+比例反而降低了很多呢，甚至比单独培养的CIK更低？1 n' ^$ C2 @, G5 P6 M
再上个混合培养的CIK照片吧，各位老师看看可有什么异常？
+ H, e, v: x. d+ l, {- n( |3 Z
" B) ?9 P: X  ^0 ]) U5 R混合D0
" I" x. H2 _2 C4 F2 r# F
- K, U  @) Z6 T1 R' M8 v( g  I; _) N6 z& n, Q- n$ r
/ R4 I0 Q# d' r/ s& e/ Z; X
这2个是混合D42 x% q% c% F; D( N1 `7 V. S6 I! l

3 J' ]+ j( O" Y+ u- S& r; b附加信息，样本来源为30岁男性，健康状况良好，无不良嗜好或非常规工作生活时间7 `. @( z5 x! Q& u2 m* u

snowny007

同求，个人也做过DC+CIK混合培养实验，混合后，双阳性比率略有增加，但细胞增殖数量却不如CIK单独培养。+ f( C  U& h2 M/ ~

lyj-0017

回复 baby00000003 的帖子1 @) |4 F0 o9 p2 c3 S3 V5 m" {7 }
2 U, I  p; F" ]/ ^! e
没有混合培养过，不是太懂。以前见过夏建川的课件里也有混合培养的流式检测图，他那个混合培养的细胞中CD3+CD56+的比例也不高，还不到4%。我建议你做个平行试验，再将两组细胞分别进行检测看看。

baby00000003

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可是之前混合培养的CD3+/CD56+都能到40%以上呢......困惑ing...

lyj-0017

回复 baby00000003 的帖子
3 y- `' P7 k( s# \: i' ]' |- X& }  q7 @# x, Z
我CIK单独培养有的患者都能达到60%多来，那还比你这个混合培养的好很多，所以说，混合培养相对于单一培养没有什么优势，况且患者也存在个体差异的问题。

hsu86

理论上混合培养能刺激双阳性的比例，但是在实际培养中发现单独培养的CIK不必混合培养的差，而且单独培养的CIK杀伤实验结果也不必混合培养的差。6 g8 v( u1 M7 T" U/ O
就图片而言细胞形态是趋向于成熟的) Y. N/ A7 Q: h2 g
当然我没有用抗原刺激DC细胞，不知道是否是这个原因。