谁做过囊胚注射生产嵌合体啊？讨论一下

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! R" U# t7 k' s1 S! R9 q# {0 f! C8 H1 s+ t0 J: l, g: t1 p# S
最近想尝试一下，之前没做过。
$ o$ ~2 _, H# U- r" v6 cES细胞消化后，形成的单细胞不是很多，感觉很多都是连在一起的。所以用注射针吸细胞时很困难。而且经常会在针尖处形成黏连的大团，堵塞注射针。
2 n4 c, s, h' W7 E3 ~并且注射针在使用过程中，在针尖内壁经常附着石蜡油，影响控制。
" D) y4 n" b3 n/ _6 Z, Y+ C
0 R( g/ J) U& w8 U哪位做过，诚心求教！~~~

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3# swzyh / K/ H+ V  Y* V' D
. P0 J% h: t+ F: q! `# H* C+ x
同意！4 m* ^6 x0 ]) ?5 F4 K, N
确实细胞预处理不到位
. i/ q5 N" o# c" d- ~, Z1 Q要是说的详细些就更好了

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6# niyou
; v3 Y+ m5 P5 f- k: n1 x5 g/ B8 q" x% w- C4 A5 G& Q
+ z( t% p$ t0 b; l
目前我们已经把很多问题都解决了  h1 \2 m6 M* J) p$ k
但还是存在石蜡油在注射针内壁附着的问题
0 t) a, x( h' H# ~我们使用的是10%的PVP

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8# niyou , _5 A% F+ B$ i& F/ b4 g

+ \4 x3 o  M* t8 k  B
2 w9 I* @! w, }8 _- Z感谢！~~~5 [1 o  i6 v0 v' U" i
我们用的是国产玻璃管，其他用品都是大公司的产品。
- e7 X- V# v1 D3 c9 z如果用WPI玻璃管，是不是不经任何处理就可以进行拉制？% b! }. c3 f# T0 v$ B# B- [
另外WPI玻璃管的规格是多少？
. x) v+ `# ^* B在拉制过程中，感觉内径0.8mm的要比0.6mm的拉制的针效果好（壁薄）。
( T, h$ f0 h2 I6 R( s我们主拉力80，副拉力30" c6 c/ v* C0 n1 @3 Y5 @- [
% V2 N# r) `# n2 g; ?" k
麻烦，给个WPI公司订货的方式吧？！
6 p% q! y, _. B/ P; l! P以前没和WPI打过交道
! X) b& A$ s0 J8 O8 N3 c+ c: W& G谢谢！

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给你一个建议，把消化后的ES细胞放在冰浴上几分钟，这样可以减少黏连。% r& G# i" H2 t' ]. c. L1 G
ghostsolo 发表于 2009-9-5 15:14

6 k8 y' H, b7 `
冰浴在很多文献中有报道9 P1 X7 @' A+ p: W3 W- k
它能够增加干细胞的“刚性”，避免聚集成团
- }3 Q5 V$ V  g, K# W我们在实验过程中发现，制备好的细胞悬液即使不经过冰浴或低温工作台同样能够达到较好的效果。
5 y, p% {# e; ?1 p3 n6 O可以考虑省略冰浴！