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CIK培养如何快速增殖   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-5-18 09:37 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
CIK细胞培养,我们实验室是做自体CIK细胞培养,由于血都是来自肿瘤病人,个体差异比较大,细胞的增殖速度都不一样,隔一天增殖50%-100%之间,当遇到增殖在50%的时候会非常麻烦,培养的周期很长,患者各种不满,在这想问问大神们,如何增加增值的速度,加什么因子,怎么加,操作流程是什么,我们实验室流程为:分离淋巴细胞,10的六次方密度接种,当天加入r干扰素,第二天加入CD3100ng/ml和白介素21000U/ml,之后隔一天补一次液,一直到量够。
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沙发
发表于 2015-5-18 10:59 |只看该作者
cd3的浓度有点低吧?还有提前24h包被一下瓶子
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藤椅
发表于 2015-5-18 11:24 |只看该作者
因子浓度上没太大问题,最好是控制好培养密度,不要一味的补液,越是长得慢越是要控制好密度,不知道使用的是什么品牌的CD3,有可能是细胞没有被活化。
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板凳
发表于 2015-5-18 12:15 |只看该作者
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这种传统工艺就是这样的,细胞增殖速度和细胞量都不理想,要想获得高的细胞增殖速度和大的细胞量必须更换培养工艺,探寻更好的培养方法。
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报纸
发表于 2015-5-18 15:20 |只看该作者
你可以试试加入CD28,还可以加IL-1a,而且加入CD3和IL-2后培养基颜色没变黄不用补加培养基。
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地板
发表于 2015-5-21 17:03 |只看该作者
你补液补的太频繁了 还容易污染
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发表于 2015-5-22 10:28 |只看该作者
可以一次性多补点,比如5倍补
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发表于 2015-5-26 15:34 |只看该作者
因子加这个浓度,挺高了。可以试试吧接种密度调到1.5X10^6. 再不行的话,试试加自体血浆,血浆要提前灭活
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发表于 2015-5-27 14:45 |只看该作者
以前遇到过这种情况,自体培养没问题 脐血CIK 生长不好。  后来我们换了个培养体系。。。。
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发表于 2015-6-2 14:30 |只看该作者
补液要看增值的状况来,隔一天补液。不行的。。一般4-5天增值最快了。。前期没必要补液的啊。。
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