有用流式分选获取纯化的MSC吗？

yahooyeah

有用流式分选获取纯化的MSC吗？, e7 x% T. J5 A
使用的方法是骨片迁移MSC方法，由于获取纯化MSC较为困难，目前正尝试使用流式分选方法获取CD45-CD11b-细胞并进行继续培养。
* @) r: T% V; Z" J' V但观察发现细胞状态有一定影响。请问各位有人做过这方面的实验吗？

daviddow

很少有人这么做。都是直接培养的

s02260441

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/ @2 w  G  y) `7 M, n* {  I! `! ]8 H" |: H5 i# d  W* q
我想应该是Sorter对细胞造成伤害了。
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导致细胞不够健康。7 h6 ?: T+ ~' M6 m: h, |7 u
3 @7 [3 |" E$ ]% T) m  T8 _. B
分选多多少少都会伤害到细胞。+ m% O) w: K" H" U

8 ^( _( @  v; _7 z$ r' D" p可能要从分选方式作改善。

yahooyeah

回复 daviddow 的帖子  X' ~$ V2 S1 l$ r& Z7 m2 N( A
8 ~$ w6 h8 d3 A: R6 x
比较困扰的问题是，直接分离培养获取纯化MSC仍然存在困难。我已经把所有条件都摸索过了，但是依然很难获得稳定的纯化方法。
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/ y4 N  l6 y# g  j" Q7 t* d  W我的方法是骨片消化法迁移出MSC，存在困难啊。

蜗牛爱贝贝

骨MSC没有接触过，不过个人感觉，流式成本太高再次就是对细胞有伤害，所以不太建议用流式，还是用培养方法比较好些，你可以变换下因子看看

yahooyeah

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6 H$ O" L( {9 X8 S1 o真是十分困惑，觉得分离纯化没有想象那么简单，但是一直找不到好的稳定方法。

zhangshich

MSCs本来就是一群混杂的细胞群，并没有说哪个标志物表达就一定是MSCs，所以分离纯化的MSCs好像不太合适，但可以从分离的MSCs中分离出某一细胞群，比如CD90+CD34-等

daviddow

回复 yahooyeah 的帖子% t  u+ ]% B8 J" t

2 N; B' [* s; b$ U$ [) [; H很少分离啊。别人基本都是自己制备的，培养出来的就是啊

蔚海橙天

你分的是人的还是动物的？如果一定要用流式分的话，一些实验细节注意一下：培养基的成分，是否有加一些supplements，分选时候机器的调节，分选后最好用完全培养基或者加大血清浓度，看看你分出来的细胞会不会好一些

yahooyeah

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3 P% h6 Y- \$ G; [尝试了几次，培养后效果不好，增殖传代效果不佳，看来有些细节需要注意下