新手求教，诱导分化21天，细胞都长满了，如何解决这个问题？

梦月寒

如题

studentyin

主要还是接种密度要摸索一下

luyue6453

买成品的诱导试剂盒，在细胞不太密的情况的就开始诱导，及时后期长的很密只要不脱落你一样可以成功的。

yinchong42

回复 bleachmen2 的帖子' G7 {( v, \* ?
, m4 A9 q3 h0 ~
没做过，不好意思啊

bleachmen2

回复 yinchong42 的帖子6 D: @0 H& n) ~) E! _1 ]% z; e" T

4 N1 k$ H& E" t: m$ ^; B胰岛β细胞分化的做过吗？不知道现在有没有成品试剂盒卖？

yinchong42

回复 梦月寒 的帖子* O  {* G$ |2 W, W3 Z2 ]1 N
2 @' `+ ^6 i$ ^, W- C4 V" _
不好意思有点误会了，我们就是正常的成骨诱导而已，只是诱导成骨的细胞增殖没有那么快而已

yinchong42

回复 漂流瓶 的帖子& w# W1 w8 \( @/ n  Y

/ C* O3 k7 K9 B/ A$ L5 x就是这个意思吧，以前我做肌肉分化的时候，可以说就是在血清饥饿的条件下培养，细胞在增殖受阻的情况下就会分化了，成骨诱导也可以说是差不多吧

梦月寒

回复 yinchong42 的帖子
' j0 d( K5 `; M  A5 x+ T
6 T7 p- ^) C% E# l5 m. `" T我也做成骨诱导，请问你的抑制增殖用的什么，还有做CCK8测增殖不是矛盾了吗

漂流瓶

回复 yinchong42 的帖子( J- b# F  c9 F1 N0 Q- t% o% o
8 I# N$ w, U! S
哦，所以你培养的成骨细胞应该是增殖很缓慢或者基本不增殖才对，是吗？这个我就不知道了。目前我在做的蛋白中，有一种小分子应该也是具有抑制作用的，抑制分化增殖和迁移（目前的假设），可是实际实验过程中，对于分化和增殖的影响却很多样性，并不是我们一开始推论的纯粹的抑制作用。这个机理比较复杂，里面包含很多影响因素，并且体外和体内环境也不完全一致，所以我目前也在摸索中。

yinchong42

回复 漂流瓶 的帖子$ R- F; s1 M" l

7 B+ Z. F6 ^5 `, I我是做成骨诱导，但是我们的诱导培养基是具有抑制增殖功能的