新手求教，诱导分化21天，细胞都长满了，如何解决这个问题？

梦月寒

如题

wf78365421

传代

梦月寒

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+ g4 ^) h) P" w& }- `5 f; A加药的怎么传代

saier.HK

血清浓度降低些，5%FBS jiuOK5 y- r/ N* l' `5 M3 U  {

yinchong42

什么的分化？成骨吗？一般来说诱导分化都是需要考虑细胞增殖的，很多时候需要控制实验开始时细胞的数量
9 W8 ?$ T) }0 u  t, W) p6 E$ C+ _. |

漂流瓶

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: J; L- Z* l# V% Y: l1 c2 p& W* S4 `  R: K2 E
同意，这类试验在开始的时候就要考虑细胞接种密度吧。虽然这个说起来容易，其实操作起来不是很容易。我培养的是神经干细胞，如果接种密度太小，很容易分化或是凋亡，可是如果过大，增殖过快，最后成像效果又很不好，所以只能慢慢摸索了。

yinchong42

回复 漂流瓶 的帖子1 J1 i4 A0 ?# k& A! Q

% l$ I& I- ]: _1 K; A5 P, q我是做成骨诱导，但是我们的诱导培养基是具有抑制增殖功能的

漂流瓶

回复 yinchong42 的帖子; d- G6 \4 ~* A% G3 r. Z

' H! t" z2 t, X哦，所以你培养的成骨细胞应该是增殖很缓慢或者基本不增殖才对，是吗？这个我就不知道了。目前我在做的蛋白中，有一种小分子应该也是具有抑制作用的，抑制分化增殖和迁移（目前的假设），可是实际实验过程中，对于分化和增殖的影响却很多样性，并不是我们一开始推论的纯粹的抑制作用。这个机理比较复杂，里面包含很多影响因素，并且体外和体内环境也不完全一致，所以我目前也在摸索中。

梦月寒

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我也做成骨诱导，请问你的抑制增殖用的什么，还有做CCK8测增殖不是矛盾了吗

yinchong42

回复 漂流瓶 的帖子9 H4 Z! k4 ]$ ]6 `: U) e" q
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就是这个意思吧，以前我做肌肉分化的时候，可以说就是在血清饥饿的条件下培养，细胞在增殖受阻的情况下就会分化了，成骨诱导也可以说是差不多吧