脐带血CIK细胞的详细制备及培养过程 刚开始做希望大家多多帮忙

张荣华

求教脐带血CIK细胞的详细制备及培养过程

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脐带血CIK细胞跟自体外周血培养差不多，只是离心速率及时间问题，比自体稍微大点，吸取白膜层大概能吸取5毫升左右。
5 x" Q9 r% A8 W+ `3 n* r脐带血比外周血培养时红细胞较多，后面不一定死的完。密度一般是保存在1.0-2.0*10^6个/ml左右。

pengxuleo

回复 海北 的帖子2 Y# G1 x8 [) g" ]
2 `. \, [# [. y
是可以的，CIK的主要效应细胞是CD3CD56双阳性的细胞的。但是一般情况下，都会检测一下T细胞、NK细胞等，所以就检测CD4,CD8,CD16等了

鸵鸵

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$ X4 x+ e6 M* @4 M6 _& a1 f7 U" x; y& m, a
依据我们的培养经验，6*107/ml的初始接种密度是太高了，营养达不到，反倒会产生生长抑制，我们就和外周血CIK一样1-2*106的初始接种密度，后期补液根据生长状况进行调整，增殖效果还是很好的

鸵鸵

回复 海北 的帖子  P' g/ b7 y0 e0 u& [% r

8 C. D# U. \6 T1 w2 j" z. @+ kCD3-/CD16+CD56+是NK细胞的特异性标志，是要一起检测的

鸵鸵

回复 leaderhou 的帖子
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* @) s- \0 C* g+ M请教如何提高CIK的cd3cd56的阳性率呢
& q' w+ A% {8 j/ _3 g1 ~http://www.stemcell8.cn/thread-79500-1-1.html: l+ d. k& ^0 ]
你可以看一下这个帖子，就是针对你说的这个问题的

海北

回复 pengxuleo 的帖子2 `0 f5 Y2 K+ \- g! _6 O8 q- Q
- l* B& C! r( T7 R. |/ M
那为什么不只检测CD56，还要再检测一个CD16

leaderhou

回复 小刘 的帖子' r+ [' \  \/ U7 N9 V# I
+ r8 D/ _6 R9 |! e$ D' q7 U# c
我们养的CIK细胞的增殖倍数都很好，我甚至养过一次14天的增殖倍数到了1000多倍，但是CD3CD56的双阳率一直不高，不知是什么原因呢。我们自己做流式，也曾经送去第三方检验，流式应该没有太大问题，还是培养体系的问题。

leaderhou

回复 小刘 的帖子& i, g, e# T7 m6 w) b$ h! \( e

) g$ J' e! {$ q4 S3 g比如100ml脐血，分离得到了1.2*108的细胞，那么我的接种细胞数就控制在6-8*107就可以了吗，我们用175cm2的瓶子接种，接种密度呢？

leaderhou

回复 小刘 的帖子3 {+ E. j; o( e0 r
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6*107是一次的接种细胞量吗？6*107/ml的初始接种密度是不是太高了啊，文献上大都在1-2*106的接种密度啊