STO饲养层MMC处理后形态很诡异且大量死亡是怎么回事？

iamzhangxiaoyu

如题，P.S.我养的精原干细胞，之前发现CO2培养箱CO2浓度不准，会不会是这个原因导致的？求大牛解答，上图见附件

iamzhangxiaoyu

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6 A( P% A% V9 C
谢谢你的解答，受益匪浅

w343989328

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0 d& @2 D* m/ J/ uMEF培养条件是跟STO一样，也难养，但是确实是因为STO长不出SSC的克隆出来。: Q" i$ K+ ?: u- l* p3 H8 ~
MEF一般还是可以传几代的，实在不行就自己分离吧。
: R" O- P7 I9 [4 L; {# R) j9 I; m* }) W; E5 t) I/ k
PS.我自己感觉，国内做SSC的，用brinster体系的人很少，现在基本也没看见过brinster体系的文章了。反而T.shinohara的体系很高产，接受范围广。还有一点很重要的就是，T.shinohara本来就是brinster实验室出来的，他为什么不接受原来老板的体系而去开发一套新的。所以我觉得brinster体系本身就有问题。

iamzhangxiaoyu

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6 L% ]# F- E4 W: k. w/ dMEF的培养条件不是和STO一样吗？之前买了一瓶回来养，后来冻存解冻发现MEF死了好多，到第二代第三代就不长了。。。

w343989328

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后来弃用STO了，改用MEF

iamzhangxiaoyu

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& Q" }1 A8 G6 d( F
3 u) g3 u+ O. P# r; `5 R; Z那正常都是先培养STO做饲养层再铺细胞，难不成STO也要用SSC的培养液养吗？您是怎么解决这个问题的？

w343989328

这是由于换了培养基的原因，原来培养STO是10%FBS的培养基，而SSC一般都是没有血清的，特别是Brinster的体系；
+ P$ i* x5 y; {1 B! x) g: l另外，如果培养的是原代的SSC，也有可能是纯化的时候没有把体细胞去干净，体细胞疯狂增殖造成的。

iamzhangxiaoyu

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( p1 C' m0 `+ d0 e' _
; L# t% S% A# x1 _0 B饲养层都变成丝状了是怎么回事

iamzhangxiaoyu

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% d' r6 M1 v/ ^* S, i$ z但是普遍情况下都是用37度培养吧

iamzhangxiaoyu

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: C! i  E8 r) q8 E+ R- U0 H! h8 H& Z: H6 {$ T
现在的问题是不用MMC处理STO可以在体外长得还行，只要做成饲养层，形态就发生奇怪的变化，而且有很多发生凋亡的STO