STO饲养层MMC处理后形态很诡异且大量死亡是怎么回事？

iamzhangxiaoyu

如题，P.S.我养的精原干细胞，之前发现CO2培养箱CO2浓度不准，会不会是这个原因导致的？求大牛解答，上图见附件

shan

培养箱中的CO2的主要作用是用于调节细胞培养基的pH值，它是利用的CO2气体与培养基的碳酸氢盐形成碳酸盐缓冲对稳定培养基的Ph值于生理状态，利于细胞的生长。CO2过高或过低都可以打破缓冲对PH的调节，使培养液偏酸或偏碱，从而细胞生长迟滞或停止生长，更碱的条件可以引起细胞退化甚至死亡。

shan

另外，有文献显示温度对精原干细胞影响比较大，有文献说34℃是体外培养小鼠精原干细胞较理想温度。

shan

仅供参考，谢谢。

iamzhangxiaoyu

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( _6 T# q; L7 W) c% N9 c
9 @7 ]0 j8 `/ }( V现在的问题是不用MMC处理STO可以在体外长得还行，只要做成饲养层，形态就发生奇怪的变化，而且有很多发生凋亡的STO

iamzhangxiaoyu

回复 shan 的帖子, b( b) n+ l/ C8 v

6 d2 Z9 c9 z; [% [* B; z但是普遍情况下都是用37度培养吧

iamzhangxiaoyu

回复 shan 的帖子+ L* W9 j3 i' B  k' K1 S3 t7 I

) k) Y2 _9 D2 f: Z+ x( H9 X饲养层都变成丝状了是怎么回事

w343989328

这是由于换了培养基的原因，原来培养STO是10%FBS的培养基，而SSC一般都是没有血清的，特别是Brinster的体系；5 V  H. i, X# A
另外，如果培养的是原代的SSC，也有可能是纯化的时候没有把体细胞去干净，体细胞疯狂增殖造成的。

iamzhangxiaoyu

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' q$ w8 i8 J+ y- w  m8 H1 Z9 x( q7 B5 i$ m
那正常都是先培养STO做饲养层再铺细胞，难不成STO也要用SSC的培养液养吗？您是怎么解决这个问题的？

w343989328

回复 iamzhangxiaoyu 的帖子  ?0 a8 c1 B3 J7 E, U

8 v/ a) T- V; M" G+ V! x后来弃用STO了，改用MEF