STO饲养层MMC处理后形态很诡异且大量死亡是怎么回事？

iamzhangxiaoyu

如题，P.S.我养的精原干细胞，之前发现CO2培养箱CO2浓度不准，会不会是这个原因导致的？求大牛解答，上图见附件

shan

培养箱中的CO2的主要作用是用于调节细胞培养基的pH值，它是利用的CO2气体与培养基的碳酸氢盐形成碳酸盐缓冲对稳定培养基的Ph值于生理状态，利于细胞的生长。CO2过高或过低都可以打破缓冲对PH的调节，使培养液偏酸或偏碱，从而细胞生长迟滞或停止生长，更碱的条件可以引起细胞退化甚至死亡。

shan

另外，有文献显示温度对精原干细胞影响比较大，有文献说34℃是体外培养小鼠精原干细胞较理想温度。

shan

仅供参考，谢谢。

iamzhangxiaoyu

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7 x7 Y. f" l8 y; Y& S
0 x/ f8 o& S* ~3 Z现在的问题是不用MMC处理STO可以在体外长得还行，只要做成饲养层，形态就发生奇怪的变化，而且有很多发生凋亡的STO

iamzhangxiaoyu

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3 o, h9 o$ z% y! X+ f' G: \但是普遍情况下都是用37度培养吧

iamzhangxiaoyu

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% Z/ s* l: w5 g; P9 N% x
4 r2 X" G$ W3 A饲养层都变成丝状了是怎么回事

w343989328

这是由于换了培养基的原因，原来培养STO是10%FBS的培养基，而SSC一般都是没有血清的，特别是Brinster的体系；
8 Z3 L5 r* j" S$ K; @- h另外，如果培养的是原代的SSC，也有可能是纯化的时候没有把体细胞去干净，体细胞疯狂增殖造成的。

iamzhangxiaoyu

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8 r. X. u! F/ a! k8 h  A6 s/ f6 g" E# S9 l# @" i
那正常都是先培养STO做饲养层再铺细胞，难不成STO也要用SSC的培养液养吗？您是怎么解决这个问题的？

w343989328

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: ~6 {! E  M& X) M
后来弃用STO了，改用MEF