STO饲养层MMC处理后形态很诡异且大量死亡是怎么回事？

iamzhangxiaoyu

如题，P.S.我养的精原干细胞，之前发现CO2培养箱CO2浓度不准，会不会是这个原因导致的？求大牛解答，上图见附件

iamzhangxiaoyu

回复 w343989328 的帖子
, q# i" X; L$ K' g$ J$ l, I' s( ]/ d: U
谢谢你的解答，受益匪浅

w343989328

回复 iamzhangxiaoyu 的帖子
. [+ b: ~; M8 X7 X* j, f: a: z1 A8 z2 I, C2 p/ Z0 m# l
MEF培养条件是跟STO一样，也难养，但是确实是因为STO长不出SSC的克隆出来。9 I" v' V( D6 N( R6 b" n" Q
MEF一般还是可以传几代的，实在不行就自己分离吧。4 Q% K" x+ O( i3 f* V+ b+ M# E* Z

' c) E) }$ _) d/ T) |$ v( D2 P8 y! YPS.我自己感觉，国内做SSC的，用brinster体系的人很少，现在基本也没看见过brinster体系的文章了。反而T.shinohara的体系很高产，接受范围广。还有一点很重要的就是，T.shinohara本来就是brinster实验室出来的，他为什么不接受原来老板的体系而去开发一套新的。所以我觉得brinster体系本身就有问题。

iamzhangxiaoyu

回复 w343989328 的帖子
3 z4 f/ k5 W( X1 Q
6 y" a( h  |5 R1 h: hMEF的培养条件不是和STO一样吗？之前买了一瓶回来养，后来冻存解冻发现MEF死了好多，到第二代第三代就不长了。。。

w343989328

回复 iamzhangxiaoyu 的帖子" h. {' a% ^& g  j7 M
$ t/ e$ P7 l' ]' _' J$ l1 {% V
后来弃用STO了，改用MEF

iamzhangxiaoyu

回复 w343989328 的帖子3 ]$ t5 O+ n0 }; n/ b) e

8 Y8 ~! @) j& y7 l0 [6 b1 U4 H那正常都是先培养STO做饲养层再铺细胞，难不成STO也要用SSC的培养液养吗？您是怎么解决这个问题的？

w343989328

这是由于换了培养基的原因，原来培养STO是10%FBS的培养基，而SSC一般都是没有血清的，特别是Brinster的体系；
2 H$ w9 K3 |! _$ p4 N0 \' Y  P" F& U; s另外，如果培养的是原代的SSC，也有可能是纯化的时候没有把体细胞去干净，体细胞疯狂增殖造成的。

iamzhangxiaoyu

回复 shan 的帖子$ D; C2 w/ u7 C5 N, Y! j; v; l1 Z1 V

( N, O' I; |( G饲养层都变成丝状了是怎么回事

iamzhangxiaoyu

回复 shan 的帖子- \* v8 \7 P6 U. d/ L/ E

/ @6 E$ c, n( f5 e/ D* f3 p但是普遍情况下都是用37度培养吧

iamzhangxiaoyu

回复 shan 的帖子
  E& Z7 ?- R3 U2 `" g8 n# g% s- d# m
现在的问题是不用MMC处理STO可以在体外长得还行，只要做成饲养层，形态就发生奇怪的变化，而且有很多发生凋亡的STO